论文部分内容阅读
目的食管癌是最常见的恶性肿瘤之一，现在的主要治疗手段是以手术为主的综合治疗，但是5年生存率依然不乐观。近几年肿瘤干细胞学说为肿瘤的发生、发展、复发转移和治疗等带来了新观点和新思路。我们想通过对干细胞转录因子Nanog在食管癌表达意义的研究，为进一步筛选食管癌临床诊断、病理分型及治疗提供理论基础和实验依据。方法1、通过免疫组织化学检测Nanog蛋白在食管癌组织和癌旁组织的表达及意义；2、通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1、Eca-109中Nanog蛋白的表达及意义；3、应用LipofectAMINE2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率，再通过RT-PCR和Western Blot检测siRNA的沉默效率；4、转染后通过MTT法测出各转染组细胞96h的生长曲线。结果1、Nanog在食管癌中比癌旁组织中明显高表达，主要在细胞质中表达，与病人的性别、年龄等临床特点无关；与病人的分期成正比，与分化程度成反比，并有统计学意义；2、Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1、Eca-109中高表达，主要定位在细胞质，有少量细胞核表达；3、细胞转染率为(67.57±16.90)％，Nanog siRNA沉默效率可高达80%以上；4、转染后测得96小时Nanog siRNA组较各对照组细胞增殖速度减慢，并有统计学意义。结论1、在食管癌组织中，Nanog蛋白表达量明显高于癌旁组织，并与食管癌的病理分期和分化程度有关；Nanog在食管癌的发生、发展、维持细胞的低分化中起重要的作用，可能成为诱导食管癌分化成熟的理想靶点，对评估食管癌恶性程度的评估有一定价值。2、Nanog蛋白在食管癌细胞系Eca109和TE-1中高表达，细胞之间的表达差异说明细胞分化状态的不同，提示食管癌中肿瘤干细胞的存在；通过RNAi技术降低其表达后发现细胞的增值减慢，说明降低Nanog蛋白的表达可以减慢食管癌的生长增值，提示通过抑制Nanog的表达可能成为治疗食管癌的方法之一。