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硫酸多粘菌素B临床上主要用于敏感菌引起的及绿脓杆菌引起的感染和炎症,是十个氨基酸组成的多肽碱性抗生素。其结构复杂、稳定性差,分离纯化工艺在工业上一直是个关键技术难点。本论文考察了该化合物的理化性质、建立了定性定量HPLC方法,采用单因素实验方法对其分离纯化工艺(滤膜法、离子交换法、沉淀法和吸附法)进行了优化研究。经验证,采用新的分离纯化工艺,多粘菌素B1+B2+B3+B1-1纯度达到95%以上,多粘菌素B3低于3.0%,多粘菌素B1-1低于2.0%,整个工艺提取收率不低于70%。本论文首先建立了多粘菌素B的定性和定量分析方法,在此基础上对其稳定性进行了考察。多粘菌素B最佳稳定pH范围为5.5-7.0,最佳工艺温度范围为25℃-30℃。发酵液预处理及固液分离工艺优化:采用单因素方法确定,酸化最佳pH为3.0-4.0,选用截留分子量为500 KD的超滤膜对多粘菌素B发酵液进行过滤分离的预处理可以得到比较好的处理效果。分离纯化工艺优化:采用单因素方法确定,树脂工艺吸附效果最佳为阳离子交换树脂为Na+型IRC86,最佳吸附时间为1h,最佳pH范围为6.5-7.0,多粘菌素B发酵液的最佳浓度为1.6-2.0 mg/mL,离子交换柱高径比在4:1以上,上柱液最佳pH为6.5-7.0,最佳上柱液的流量为1.0mL/min,硫酸洗脱液的浓度选择为1 mol/L的溶液,硫酸洗脱液的流量为1.0 mL/min。色谱纯化工艺研究:上样温度为25℃,洗脱液浓度为20%甲醇时产物纯度和浓度最高。洗脱温度对洗脱过程和结果的影响最大在30℃条件下,吸附在色谱柱上的多粘菌素B可以完全洗脱,产物溶液中中多粘菌素纯度提高到95%以上,收率不低于85%,回收率不低于95%。脱色工艺优化:活性碳吸附法,对脱色工艺的研究确定了实验最佳脱色剂为767型活性炭,活性炭的用量为多粘菌素B质量的10%-25%,最佳溶解液pH为4.0-7.0,脱色时间选择为15 min-45 min。产品沉淀结晶工艺优化:沉淀法,通过对沉淀法工艺研究发现最佳沉淀pH值范围为10.0-11.0,最佳沉淀时间范围为15-30 min。最后通过产品干燥工艺得到最终产物硫酸多粘菌素B。通过对多粘菌素B分离纯化工艺的优化,确定了工艺最佳条件范围,对分离纯化工艺具有较高的意义。与传统纯化工艺相比具有终产品纯度高、几乎不含杂质和色素,工艺流程简单的优点,为工业化生产奠定了基础。