目的：　　 创伤后应激障碍（post-traumatic stress disorder, PTSD）是对严重应激源的一种异常精神反应，是应激精神疾病中最为典型的一种，随着战争、社会暴力事件、重大交通事故和自然灾害等创伤意外的增多，PTSD发病率越来越高。现今，PTSD以其发病率、患病率高、慢性病程、难以治愈等特点，严重影响人们身心健康而备受关注。　　 PTSD其生物学机制主要包括以下三个方面：皮质类固醇激素受体功能下调，去甲肾上腺素能系统的兴奋，以及5-HT能系统的缺陷。正常状态下5-HT能阳性细胞广泛分布于中缝核各部，尤以中缝背核部位密集，因此中缝背核可能在PTSD的发病中起重要作用。　　 PTSD是一种典型的应激性精神障碍疾病，5-HT功能失调使机体在应激时不能维持内环境的稳定，可能是应激相关障碍的重要病因学基础。在已知的5-HT受体中，5-HT1A作为治疗焦虑、抑郁等精神障碍的主要关键点受到了特别关注。近年的研究显示，PTSD大鼠中缝背核神经元可能发生凋亡，大量实验研究发现细胞色素C(cytochrome c，Cyt-c)从线粒体释放到细胞浆是多种细胞凋亡的共同表现，而Cyt-c基因敲除的细胞能对刺激因素诱导的凋亡具有明显的耐受性，Cyt-c是线粒体介导的细胞凋亡途径中不可缺少的重要因子，在凋亡过程中起着关键作用。　　 “单一连续刺激(single prolonged stress，SPS)”SPS动物模型是目前探讨PTSD发病机制的较理想的实验模型，该方法已经被国际所认同。因此本研究采用SPS方法刺激大鼠制作PTSD模型，并研究刺激后中缝背核神经元各时间段5-HT1A受体的改变及线粒体凋亡途径的关键点Cyt-c的表达变化，旨在探讨脑内5-HT能细胞密集分布的中缝背核，其功能失调在PTSD发生机制中发挥的重要作用，为揭示PTSD的发病机制提供实验依据。　　 实验方法：　　 1、模型制作及分组　　 采用2005年日本文部省召开的国际PTSD科学会议确定的SPS模型。其具体方法是将大鼠按连续进行下述步骤处理：固定刺激2小时后，立即强迫性游水20min，水深40cm，水温25℃；休息15min;乙谜麻醉至意识丧失；无干扰空间常规喂养。　　 随机分为5组，即正常对照组及SPS1d、4d、7d和14d组。　　 2、5-HT1A受体的免疫组化　　 免疫组化：分别选取各组大鼠灌流固定、沉糖的大脑，制作冰冻切片，分别用PV法进行中缝背核的5-HT1A受体免疫组织化学染色，DAB显色，中性树胶封片，光学显微镜观察，摄片。　　 3、5-HT1A受体的Western Blotting、　　 Western Blotting:分别取新鲜中缝背核经匀浆、超声粉碎后高速低温离心，提取上清蛋白，电泳，转膜，经封闭后分别加一抗4℃过夜；HRP标记IgG孵育2h，ECL发光，检测条带各光密度值。　　 4、5-HT1A受体的RT-PCR及Cyt-c的RT-PCR　　 RT-PCR:断头取脑分离中缝背核，提取总RNA，进行逆转录和PCR扩增。扩增结束后进行凝胶电泳，成像并进行积分光密度分析。　　 5、Cyt-c的光电镜酶组织细胞化学　　 灌流取冰冻切片，下降梯度PBS脱糖，孵育液37℃孵育半小时，甘油明胶封片，光镜下观察，摄片。　　 常规电镜制样，倒扣包埋、聚合、半薄切片定位，AO超薄切片机进行超薄切片，透射电镜下观察。　　 结果：　　 1、5-HT1A受体的免疫组化、Western Blotting及RT-PCR的结果　　 PTSD大鼠中缝背核神经元5-HT1A受体的各项表达于SPS7d达高峰，SPS14d逐渐下降。　　 2、Cyt-c酶组化及透射电镜及Cyt-c的RT-PCR结果　　 光镜下，与正常对照组相比，SPS组中缝背核神经元Cyt-c阳性表达明显增加。电镜下，SPS后，中缝背核经元出现线粒体肿胀，Cyt-c从线粒体释放入胞浆。在正常组大鼠中缝背核中Cyt-c mRNA有少量表达，SPS刺激后，Cyt-c mRNA的表达出现逐渐上调的趋势。　　 结论：　　 1、PTSD大鼠中缝背核神经元5-HT1A受体的改变导致5-HT能系统调控紊乱，可能是大鼠焦虑和情绪紊乱的重要病理生理基础之一。　　 2、PTSD大鼠中缝背核Cyt-c从线粒体释放入胞质，是介导中缝背核神经元凋亡的发生的物质基础。