研究背景及目的原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)是人类常见的恶性肿瘤之一。目前肝切除术仍是治疗肝癌首选和有效的方法,但因其早期症状不典型,一般在发现或确诊时即为中晚期,导致手术切除率仅为20%～30% ,严重影响了肝癌患者的生存率[1]。对于不能手术切除的肝癌目前多采用以局部干预为主的综合治疗。近年来,肝癌的微创性局部治疗方法相继开展,主要包括射频消融(Radiofrequency ablation,RFA)、微波、冷冻、超声聚焦、无水酒精注射治疗及经肝动脉或门静脉栓塞治疗等。其中RFA逐步发展成为肝癌局部治疗的较为成熟、疗效较好的治疗方法。RFA治疗后残余肿瘤影响治疗效果,对肝癌的后续治疗至关重要。国内外学者对肝癌侵袭性转移复发机制进行了大量研究,尤以新生血管生成的研究较多,认为大量肿瘤新生血管形成是其转移复发的主要因素之一。肿瘤能够分泌诸多促进血管生成因子,其中以血管内皮生长因子(vascular endothlial growth factor,VEGF)的研究较多,肿瘤释放高水平VEGF对肿瘤新生血管形成及触发转移起着重要作用,VEGF表达高低常预示着肝癌恶性程度及转移率高低。本实验通过制作兔肝VX2肿瘤RFA后的残余瘤模型,光镜下动态观察RFA后残余肿瘤的病理学变化,揭示RFA后残余肿瘤的生物学活性变化特点,为RFA的临床治疗提供理论依据。材料和方法采用开腹对48只新西兰白兔接种VX2肿瘤,成瘤后开腹射频消融制作残余肿瘤模型。将模型随机分成6组,分别于RFA之前、术后1 d、3 d、1 w、2 w及3 w,切除标本,对肿瘤的不同消融带行HE染色,光镜下动态观察RFA后残余肿瘤的病理学变化,以及不同消融带的VEGF及MVD的表达。结果本实验48例动物,成功建模42例(成瘤率95%),2例于种植后7天死亡。术后2 w内腹腔转移2例,成功42例,肿瘤种植术后14 d腹部CT检查见肝内均为一处病灶,病灶直径多位于1.8 cm~2.0 cm。肿瘤位于左肝实质内,无分叶,呈灰白色,质地较硬,表面较光滑,无明显包膜,与周围肝组织分界不清,肿瘤剖面呈鱼肉状,中心部位可见不同程度坏死。光镜观察未行RFA治疗的肿瘤细胞呈浸润性生长,与周围肝实质无明显分界,与间质分界不清,间质内可见厚壁血管,结缔组织较少,绒毛多密集、纤细。肿瘤细胞形态不规则,可呈巢状分布,核大深染,有明显的异型性,核分裂相多见,核浆比大,胞浆丰富,淡红染色。间质内可见淋巴细胞、浆细胞浸润。实验组瘤灶中心大都可见凝固性坏死,可见胞核固缩、碎裂或崩解,周围见大量红染的无定形组织。VEGF在针道区及凝固坏死区于术后3 w内一直呈低水平表达,而交界区VEGF水平表达明显明显增强,与针道区及凝固坏死区差别明显(P <0.05)。RFA后MVD值在凝固坏死区及针道区均较低,两者之间无明显差别(P>0.05),交界区MVD于消融后逐渐升高,约于2 w左右稳定交界区与针道区及凝固坏死区MVD差别明显P <0.05。结论1.兔肝脏VX2肿瘤模型,具有复制简单、成功率高、成瘤周期短等的特点,可较好地应用于肿瘤射频消融的研究。2.针道和凝固坏死区内肿瘤细胞几乎可达到完全杀灭,在交界区仍可见肿瘤残余。3.在针道和凝固坏死区可达到完全去血管化,对于交界区的残留,射频消融有可能促进其转移,故仍需要进一步治疗。