根结线虫(Meloidogyne Goldi，1892)是世界性威胁农业生产的主要病原物。由于根结线虫种间存在显著的致病性差异，因此开展准确快速的检测和鉴定研究对根结线虫病害的检疫和成功防治具有极其重要的意义。本文对采自广东等14个省30多个地区葫芦科(Cucurbitaceae)、茄科(Solanaceae)作物上的124个根结线虫种群进行了鉴定。同时对采自不同省市的黄瓜(Cucumis sativus)根围植物寄生线虫的种类进行鉴定，并在此基础上进行黄瓜根围土根结线虫快速检测方面的研究和探索。主要研究结果如下：　　 (1)应用线虫比较形态学的方法，结合同功酶和分子生物学方法，124个种群中鉴定出5种根结线虫。其中95个种群鉴定为南方根结线虫，占鉴定总数的76.6％；9个种群鉴定为爪哇根结线虫，占鉴定总数的7.3％；3个种群鉴定为花生根结线虫，占鉴定总数的2.4％；15个种群鉴定为象耳豆根结线虫，占鉴定总数的12.1％；1个种群为北方根结线虫；未定种1个。可见南方根结线虫、爪哇根结线虫和象耳豆根结线虫是危害茄科、葫芦科作物的主要根结线虫，同时在茄科、葫芦科作物上还存在着一定数量的混合种群。本研究首次在粤北地区发现象耳豆根结线虫。　　 (2)首次建立南方根结线虫、爪哇根结线虫和象耳豆根结线虫多重PCR鉴定体系。根据文献报道的引物，结合本论文设计的引物组成多组多重PCR体系，筛选到可以成功区分南方根结线虫、爪哇根结线虫和象耳豆根结线虫的引物组合4组，其中MF/MR+Mi-F/Mi-R+Fjav/Rjav+Me-F/Me-R引物组合鉴定效果最好。　　 (3)从单个根结中直接鉴定南方根结线虫、爪哇根结线虫和象耳豆根结线虫。探索单根结基因组DNA的提取方法并用NaOH裂解的方法提取黄瓜、番茄(Lycopersicum esculentum)和蕹菜(Ipomoea aquatica)接种根结线虫后不同时期的单个根结基因组DNA，利用特异引物组合MF/MR+Mi-F/Mi-R+Fjav/Rjav+Me-F/Me-R进行多重PCR检测，可在不同虫龄期对南方根结线虫、爪哇根结线虫和象耳豆根结线虫进行同时检测和鉴定。对采自广东、广西、云南以及海南等省份不同地区的30份根结线虫病根样品提取单根结DNA并进行多重PCR检测，其中29份鉴定结果完全正确，检测成功率96.6％。　　 (4)利用土壤总DNA直接鉴定黄瓜根围土壤中植物寄生线虫。应用比较形态学结合分子生物学方法，对57份黄瓜根际土壤进行分离鉴定，发现黄瓜根围主要植物寄生线虫有：根结线虫、肾状线虫(Rotylenchulus)、螺旋线虫(Helicotylenchus)和矮化线虫(Tylenchorhynchus)。在此基础上，以rDNA-28s区为靶标设计特异性引物进行巢式多重PCR，可在一个体系中同时检测出不同四个属的植物寄生线虫，灵敏度可达到25g灭菌土中加入1条根结线虫。探讨土壤DNA的提取方法并用自制裂解液Buffer H对57份黄瓜根际土壤直接进行土壤DNA提取，纯化后进行巢式多重PCR扩增，可同时检测黄瓜根际土壤中常见植物寄生线虫，其最低检测值分别为每500g土壤中根结线虫15条、肾状线虫16条、矮化线虫10条和螺旋线虫28条。　　 (5)运用基因芯片技术直接检测黄瓜根围土壤中植物寄生线虫。根据黄瓜根围土壤植物寄生线虫形态鉴定结果，在rDNA-ITS区和28S区设计特异探针与地高辛标记后的巢式PCR产物进行杂交，经ELISA显色可成功检测到根结线虫不同种、矮化线虫、螺旋线虫、肾状线虫以及咖啡短体线虫(Pratylenchus coffea)和玉米短体线虫(Pratylenchuszeaze)。　　 上述研究成果对根结线虫快速、准确检测与诊断，对于促进我国作物根结线虫病的可持续防治有重要意义。