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抗瓜氨酸化蛋白抗体在类风湿关节炎(RA)中有很高的特异性,瓜氨酸化蛋白及其抗体在RA发病机制中的作用逐渐引起人们的重视。为探讨瓜氨酸化II型胶原(Cit-CII)和抗瓜氨酸化CII抗体(抗Cit-CII抗体)在RA发病机制中的地位和作用,本研究在体外用肽酰精氨酸脱亚胺酶(PAD)催化牛CII,使其瓜氨酸化,利用ELISA和免疫印迹的方法检测疾病组患者RA、系统性红斑狼疮(SLE)、骨关节炎(OA)和健康对照者血清中抗Cit-CII抗体,并与患者抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、年龄、病程、双手关节X线分期、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)和类风湿因子(RF)水平进行相关性分析;同时研究了RA患者对Cit-CII的T细胞增殖反应。并研究了肿瘤坏死因子(TNF)-α对催化瓜氨酸化反应的酶-PAD2、PAD4 mRNA表达的影响。结果显示,CII经瓜氨酸化后,RA患者血清对其敏感性和特异性均有所提高,敏感性从33.7%提高到50.3%,特异性从80.3%提高到90.0%;抗Cit-CII抗体与抗CCP抗体有一定的关联性,即绝大部分抗Cit-CII抗体阳性的RA患者抗CCP抗体亦阳性;RA患者抗Cit-CII抗体与年龄、病程、双手关节X线分期、CRP、ESR和RF均无明显相关性。Cit-CII并没有比原型CII引起RA患者更强的外周血T细胞增殖反应。TNF-α可以使PAD2和PAD4mRNA表达水平升高,并与TNF-α刺激的时间和剂量有关。本研究的创新之处在于:第一,在国内外首次于体外利用PAD酶催化牛CII全长蛋白瓜氨酸化成功,并发现RA血清对Cit-CII反应的敏感性和特异性均有所提高,提示抗Cit-CII抗体在RA的发病和病变进展中可能发挥作用,并且抗Cit-CII抗体的检测可能成为RA自身抗体检测的新指标。第二,在国内外首次研究了RA患者外周血T细胞对Cit-CII的细胞增殖反应,发现Cit-CII并没有比原型CII引起RA患者更强的外周血T细胞增殖反应。说明Cit-CII在RA细胞免疫发病中的作用仍需进一步研究。第三,在国内外首次研究了致炎性细胞因子TNF-α对PAD2、PAD4 mRNA表达的影响,发现TNF-α可以使PAD2和PAD4 mRNA表达水平升高,说明PAD2、PAD4的表达可能受细胞因子的调控。