拟南芥种子发育过程中SHB1基因的表达与功能分析

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种子是人类粮食的重要来源,有些植物的种子还是重要的工业原料,与人类的生产生活密不可分。因此,通过遗传学和分子学手段提高种子产量具有重要的现实意义。种子大小是影响产量的主要因素之一,以拟南芥作为模式植物,研究调控种子大小的分子机理和寻找控制种子大小的基因,不仅具有重要的理论价值,而且还可将其应用于实践,对提高种子产量起着至关重要的作用。拟南芥功能获得突变体shb1-D的种子明显较野生型的大,功能缺失突变体shb1-L的种子稍微比野生型的小。本实验通过对这两种突变体在控制种子大小方面的研究,初步得出了如下结果和结论:1. shb1-D突变体胚的细胞面积和细胞数目增加对成熟胚细胞大小及细胞数目的分析结果显示,与Wassilewskij(aWs)野生型相比,shb1-D突变体胚的细胞面积和细胞数目都增加;shb1-L缺失突变体胚的细胞面积与细胞数目与Columbia(Col)野生型相比,略有变小。2. shb1-D突变体种子的发育时期延迟对授粉后同一时间突变体与野生型种子的发育时期进行了对比分析,研究发现shb1-D突变体胚的发育较Ws野生型延迟;shb1-L突变体胚的发育时期与Col野生型基本一致。3. SHB1基因在多种器官中表达GUS报告基因在SHB1启动子驱动下的表达结果显示,在拟南芥的花、成熟花粉粒、花粉管、小苗及未授粉胚珠中具有GUS信号积累,证明SHB1基因在拟南芥植株的多种器官中表达。mRNA原位杂交结果显示该基因在不同发育时期的胚和胚乳中表达,表明SHB1基因在种子发育过程中可能起重要的调控作用。4. shb1-D突变体胚乳的细胞化延迟对授粉后5天以及胚发育处于相同时期的shb1-D突变体和Ws野生型种子进行组织切片分析,结果表明这两种条件下,野生型种子的胚乳已经开始细胞化,而突变体种子的胚乳依然没有细胞化,推测可能是突变体胚乳细胞化的延迟导致了种子体积的变大。以上结果表明SHB1基因参与了对拟南芥种子大小的控制。在shb1-D功能获得突变体中,SHB1基因过量表达,使得种子变大。该研究发现了一个对种子大小有正调控作用的基因,为深入研究种子大小决定的机理提供了重要资料。
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