肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病，由于具有扩散迁移及转移浸润的能力，使得肿瘤的治疗尚缺乏有效的手段。细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinase, CDK)是细胞周期调控的活化中心，CDK4/CDK6能够与细胞周期蛋白Cyclin D1形成复合物，进而调控细胞周期G1/S期的转换。研究表明，CDK4在多种恶性肿瘤和癌变组织中过度表达，所以CDK4与肿瘤的发生，发展密切相关。以CDK4为靶点的基因治疗体现在RNA干扰、反义寡核苷酸等方面，但这些治疗方法都存在一定的不稳定性和局限性。胞内抗体技术是近年来兴起的基因治疗技术，以抗体为效应分子，在细胞内特异性灭活靶蛋白，为肿瘤的基因治疗拓宽了新的视野。本研究将携带细胞核滞留型抗人CDK4胞内scFv基因（NLS-AK）的质粒，成功的转染进MDA-MB-231细胞中，该基因在MDA-MB-231细胞中得到有效表达并实现胞内抗体的核定位，NLS-AK的稳定表达显著抑制肿瘤细胞的生长和增殖，引起细胞周期阻滞在G1/S期，并明显诱导细胞凋亡。现在有研究证明Cyclin D1与肿瘤的浸润和迁移存在密切的关系，作为G1/S期转换过程中同CyclinD1形成复合物的CDK4及抗CDK4胞内抗体是否能够影响肿瘤的迁移和浸润以及其抗肿瘤机制尚不清楚。本研究首先筛选获得稳定表达NLS-AK的MDA-MB-231细胞株，通过划痕实验、Transwell实验分析，发现抗CDK4胞内抗体NLS-AK能够显著抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭。这些研究结果为胞内抗体在肿瘤的基因治疗中的应用得提供相应的实验依据。