【摘 要】
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目的:放射治疗是肺腺癌局部治疗的有效手段,但肺癌放疗后的远期复发转移是影响肺癌患者生存预后的主要因素之一,本文主要探讨A549肺癌放疗抵抗细胞模型中铁死亡的情况及GPX4、SLC7A11和SLC3A2的表达情况。方法:首先,构建A549肺癌放疗抵抗细胞模型。应用梯度增加电子线照射法对A549细胞反复照射,共照射10次,前三次剂量4Gy,中间四次6Gy,最后三次8Gy,累计照射剂量60Gy。然后,检
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目的:放射治疗是肺腺癌局部治疗的有效手段,但肺癌放疗后的远期复发转移是影响肺癌患者生存预后的主要因素之一,本文主要探讨A549肺癌放疗抵抗细胞模型中铁死亡的情况及GPX4、SLC7A11和SLC3A2的表达情况。方法:首先,构建A549肺癌放疗抵抗细胞模型。应用梯度增加电子线照射法对A549细胞反复照射,共照射10次,前三次剂量4Gy,中间四次6Gy,最后三次8Gy,累计照射剂量60Gy。然后,检验A549、A549R细胞的放疗抵抗性。将细胞铺于96孔板中加以培养,接着经过再次照射后,再放入CCK8试剂进行检测。之后,观察放疗对A549细胞结构及铁死亡的影响。电镜下,观察照射后的肺腺癌细胞内部变化。对两组细胞进行普鲁士染色,观察两组细胞的染色情况。比较A549、A549R细胞中GPX4、SLC7A11和SLC3A2的表达差异。分别提取两组细胞的m RNA、蛋白,应用PCR、WB技术,检测观察两组细胞的表达差异。结果:经过一段时间的放疗后,肺腺癌细胞形态出现了明显的变化。用此阶段肺腺癌细胞与亲本株做比较,会发现其表现出了较强的放疗抵抗性。电镜下,可见放疗后的肺腺癌细胞线粒体体积缩小、线粒体膜密度增加、线粒体嵴减少甚至消失、外膜破裂,而无细胞核浓缩、染色质边缘化。普鲁士染色后,放疗后的肺腺癌细胞几乎全部蓝染。PCR检测发现A549R细胞中GPX4m RNA明显低于A549细胞。PCR、WB检测结果显示A549R细胞较A549细胞SLC7A11和SLC3A2 m RNA、蛋白表达均明显减少。结论:放疗可以引起A549肺腺癌细胞发生铁死亡。在A549肺癌放疗抵抗细胞模型中,放疗抵抗通过下调GPX4、SLC7A11和SLC3A2的表达促进A549细胞铁死亡。
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