论文部分内容阅读
壳聚糖作为天然高分子具有良好的生物利用度及可降解性，但其在水中较差的溶解度在一定程度上限制了它的应用。因此具有良好溶解性能的壳聚糖羧甲基化衍生物走进了人们的视线。另外多数癌细胞表面叶酸受体的过度表达，使叶酸分子可充当优良的癌细胞靶向基团。利用这一特性，本论文在O-羧甲基壳聚糖分子上引入叶酸，制备载药纳米粒子，来实现抗癌药物的定点缓控释放，有效延长药物的体内保留时间，提高疗效。 主要研究内容如下: 1.以O-羧甲基壳聚糖(O-CMCS)为原料，基于癌细胞表面叶酸受体(FA Receptor)过表达的情况，以叶酸(FA)作为靶向修饰基团，利用NHS/EDC对叶酸γ-羧基进行活化得到叶酸活性酯，进而通过简单的水溶液途径得到目标产物叶酸改性羧甲基壳聚糖(FCC)。测定O-CMCS的分子量及氨基含量，并通过氢核磁共振(1H NMR)、傅里叶红外光谱(FT-IR)表征合成产物的结构; 2.以CaCl2水溶液作为离子交联剂，采用离子交联法制备纳米粒子(NPs)，通过扫描电子显微镜(SEM)、动态粒径光散射(DLS)考察纳米粒子的形态及粒径大小，并用荧光光谱测定FCC Nps的临界聚集浓度(CAC); 3.采用动态粒径光散射(DLS)对不同pH条件下纳米粒子的粒径进行测定，结果表明纳米粒子的粒径随pH的变化发生明显变化。同时根据身体组织细胞外pH和血液维持在7.4附近，癌细胞内核内体pH为5.5左右，癌细胞间隙液pH为6.3～6.8，确定交联剂与样品溶液的加入比例，保证纳米粒子具有良好的癌细胞环境pH敏感性; 4.以疏水性抗癌药物紫杉醇(PTX)作为模型药物，制备FCC-PTX载药纳米粒子。利用X射线衍射(XRD)，热失重分析(TGA)考察载药纳米粒子的性能，同时使用紫外分光光度法考察不同投料比下载药纳米粒子的载药量(DLC％)和包封率(EE％)，通过不同pH条件下的体外释放研究表明该药物载体对PTX具有良好的缓控释放性能; 5.使用MTT法考察O-羧甲基壳聚糖纳米粒子(O-CMCS NPs)和叶酸羧甲基壳聚糖纳米粒子(FCC Nps)对人成纤维细胞(HF Cells)的细胞毒性。并采用荧光光谱观察细胞吸收情况，结果表明载药粒子对乳腺癌细胞具有良好的靶向性能。