苎麻籽总黄酮的提取、鉴定及初步生物活性研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuekinger
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苎麻是我国重要的纺织纤维作物,在云南、四川、湖南等省份广泛种植。苎麻中活性成分的研究主要集于在苎麻的根和叶,而未见苎麻籽中黄酮类化合物的研究报道。因此本文将开展苎麻籽黄酮的提取、鉴定、初步纯化及体外抗氧化、抑制α-淀粉酶和抑菌能力研究,旨在为苎麻籽的开发利用提供研究基础。主要研究内容和结果如下:(1)通过DPPH-HPLC实验,发现苎麻籽乙醇提取物中存在多种抗氧化活性成分,扫描各色谱峰后初步推断其抗氧化活性成分多为黄酮类化合物。采用液质联用技术进一步分析苎麻籽乙醇提取物成分,共鉴别出20种化合物,其中黄酮类化合物10种,分别为原花青素二聚体、芦丁、异槲皮苷/金丝桃苷、山萘酚-3-O-β-D-芸香糖苷、槲皮素-3-O-β-D-木糖甙、山萘酚-3-O-β-D-葡萄糖苷/山萘酚-3-O-β-D-半乳糖苷、槲皮苷、槲皮素、山萘酚、阿福豆苷。其他化合物有核苷类、氨基酸类、B族维生素、糖类物质等。(2)确定了苎麻籽总黄酮含量的测定方法为Al Cl3法,通过比较芦丁、槲皮素和样品经Al Cl3法显色后的紫外-可见光谱图,选择对照品为芦丁,检测波长为401 nm,该法具有良好的精密度和回收率。通过单因素结合响应面试验,确定了超声辅助乙醇提取苎麻籽总黄酮的最优工艺:提取温度75℃、乙醇体积分数为65%、液料比为70:1(m L/g)、提取时间为25 min。在此工艺下总黄酮得率为4.98618±0.015874 mg/g。超声辅助乙醇提取相较于索氏提取和溶剂浸提法提取,获得了更高的总黄酮得率并节约了大量时间,并且能够很好的保留苎麻籽中的黄酮类成分。(3)研究了AB-8大孔树脂对苎麻籽总黄酮的吸附和解吸能力,发现AB-8树脂的吸附速度较快,解吸率较高。经AB-8树脂初步纯化后的黄酮纯度为16.47%,是纯化前(3.60%)的4.58倍。然后对苎麻籽总黄酮的生物活性进行了初步研究,发现其对DPPH自由基和羟基自由基有着一定的清除作用,且纯化黄酮的清除能力远高于粗提黄酮;纯化后的苎麻籽黄酮对于清除超氧阴离子自由基、抑制α-淀粉酶活力和抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、黑曲霉四种菌的生长能力均不明显,但苎麻籽粗提物表现出了一定的α-淀粉酶活性抑制和抑制大肠杆菌、黑曲霉生长的能力。
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