【摘 要】
：
第一部分:pBV220-LTB基因克隆与表达目的:采用基因组提取方法从野生型产毒性大肠杆菌E.coli H 44815中提取LTB基因,利用基因工程技术将其重组于表达载体pBV220,然后对含有pBV220-LTB的工程菌进行表达,蛋白质分析,为研究该蛋白质的生物学特性提供基础。方法:用PCR方法扩增LTB目的基因片段,克隆至pBV220质粒中,构建pBV220-LTB的表达质粒,转化E.coli
论文部分内容阅读
第一部分:pBV220-LTB基因克隆与表达目的:采用基因组提取方法从野生型产毒性大肠杆菌E.coli H 44815中提取LTB基因,利用基因工程技术将其重组于表达载体pBV220,然后对含有pBV220-LTB的工程菌进行表达,蛋白质分析,为研究该蛋白质的生物学特性提供基础。方法:用PCR方法扩增LTB目的基因片段,克隆至pBV220质粒中,构建pBV220-LTB的表达质粒,转化E.coli DH5α,经温度诱导表达重组蛋白。结果:经测序基因片段由374bp组成,为编码124个氨基酸残基的多肽。经SDS-PAGE分析相对分子量（Mr）约为30000D。结论: pBV220- LTB的原核表达质粒构建成功,并在大肠杆菌DH5α中高效的表达。第二部分:LTB蛋白质的家兔毒性实验目的:LTB的粘膜免疫作用已比较明确,但是任何疫苗的开发,安全性是必须考虑的问题,重组表达载体pBV220–LTB表达蛋白有无毒性,是其能否用于疫苗研究的前提,因此探讨重组LTB蛋白质对家兔的毒性作用,评价感染的可行性,为后续的双歧杆菌研究做准备,
其他文献
构建促进学生全面发展的评价标准,需要跳出一所学校、一个学段的局限,站在学生成长的视角上进行一体化的设计学生是接受教育的主体,构建良好的学生评价体系,对于促进学生的身心健康和全面发展有着十分重要的意义。落实学生评价,应关注以下几个方面。
根据国家发展要求,四川省和重庆市（简称川渝地区）将合力打造成渝地区双城经济圈,最大限度的拉动我国西南部地区经济发展,故对该区域进行大气环境空气质量的研究和评价具有重要意义。本文注意到目前对川渝地区大气颗粒物(Particulate atter with an aerodynamic diameter less than 2.5μm,PM2.5)浓度估算研究存在以下问题:首先由于川渝地区独特的地形条
目的:原核表达VP3与Tat-PTD（protein transduction domain）的融合蛋白,并纯化此融合蛋白,观察Tat-PTD介导VP3进入胃癌细胞SGC7901的透膜效应及VP3在肿瘤细胞中的定位,检测融合蛋白诱导细胞凋亡情况。方法:（1）构建含有凋亡素基因VP3和Tat-PTD结构域的原核重组质粒pET32α（+）-Tat-PTD-VP3;（2）将重组质粒转染E.coli BL
本研究应用改进的差异显示技术获取K562细胞分化相关EST，以寻找和确定决定红系分化的支配调节基因。Liang和Pardee发明的DDRT-PCR技术［2］一直被视为筛选新基因的重要方法之一，但它存在假阳性率偏高和重复性较差的缺陷。为解决此问题，我们参照Martin和Pardee的改进方案［3］，建立了一种使用长引物，进行二步PCR的改进DDRT-PCR方法，以氯高铁血红素（HEMIN）和肉豆蔻佛
目的:用苯酚-硫酸法定量葡甘露聚糖（glucomannan GM）,确定葡甘露聚糖溶液的百分比浓度。利用超声波的空化作用促使葡甘露聚糖的羟基与氨水（NH3）发生氨解反应以人工合成氨基葡甘露聚糖（aminoglucomannan AGM）并测定其氨基化程度。用荧光胺（fluram）标记氨基葡甘露聚糖并探讨标记的最佳反应条件,鉴定反应产物（Fluram-AGM）的荧光光谱特征。用荧光胺示踪氨基葡甘露聚
本论文提出一种基于磁分离靶蛋白-配体复合物快速筛选混合物配体库的技术,其过程包括（a）将混合物样品与适量外源参考配体混合作为用于筛选样品（PMFS）;（b）启动PMFS中所有配体与固定在纳米磁珠上的靶蛋白竞争结合;（c）磁力回收靶蛋白-配体复合物,提取结合的配体;（d）定量PMFS和对应结合配体提取物中每个可检测配体色谱峰面积;（e）如所有必要条件都满足,则计算候选配体与参考配体的相对亲和力,否则
网络直播中粉丝刷礼物作为一种新型虚拟礼物交换行为,和传统礼物交换相比,它超越实体性礼物的形式,强调通过粉丝和主播的互动实现回报。本文将刷礼物的行为理解为一种互动性回赠,主播通过对私密话题和身体表演的内容呈现,将个人体验与直播间的集体感知结合,采取特定的方式与粉丝建立关系。从媒介人类学的意义看,这种互动性回赠是在网络情境下基于新技术平台展开的虚拟互动,它一定程度上弥补了人在现实社会中私密关系的不足,
成长记录袋是辅助班级管理的工具和手段，通常分为学生基本信息、希望与梦想、奋斗与成长、反思与评价四个部分，反映学生的学习、生活、成长和其他活动。班主任、学科教师、家长以及学生都可以科学利用成长记录袋，能更好地发现在成长过程中的轨迹或问题所在，从中创造和挖掘出更多的教育价值，帮助学生改正、调整，继而提高。成长记录袋在以前教育中虽然也会运用，但通常来说会比较浅薄，没有充分发挥它的育人价值。新时代在
中国是一个政治共同体、经济共同体以及文化共同体,在长期的历史进程中呈现“多元一体”的民族格局。各民族投身到国家建设与现代化的建设中,从而与国家政治、经济、文化发展紧密联系。少数民族纪录片中有政治、有经济、有文化,这些影像综合性的展现了各民族形象。政治、经济、文化相连在一起共同存在于少数民族纪录片之中的,每一个影像符号都展现着特定的民族形象。本文以少数民族纪录片的发展为线索,归纳各发展时期典型民族形