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蜜蜂作为农作物的主要授粉昆虫,在全球生态系统中发挥重要作用。近年来,全球多地蜜蜂蜂群数量急剧下降,出现蜂群崩溃失调症(Colony collapse disorder,CCD)现象。化学农药的大量使用,可能是导致CCD的重要原因。基于以上,本论文建立了蜜蜂中12种农药残留的GC-MS分析方法,采集了我国13个蜂产业体系综合试验站5个主要蜜源产区共214组蜜蜂样品,检测农药残留现状。在此基础上,测定了对蜜蜂具有高暴露风险的4种拟除虫菊酯类杀虫剂对意大利蜜蜂和中华蜜蜂的急性毒性;并选取对2种蜜蜂毒性差异较大的高效氯氰菊酯,研究了其对2种蜜蜂体内4种酶活性的影响以及生存风险分析。主要研究结果如下:1.蜜蜂中高效氯氰菊酯等12种农药残留GC-MS分析方法的建立蜜蜂样品经1%乙酸乙腈溶液涡旋提取,PSA/GCB固相萃取小柱净化,GC-MS检测。结果表明,百菌清、高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、啶酰菌胺、精喹禾灵及溴氰菊酯农药在10-1000 ng/g的添加浓度下,平均添加回收率为74-112%,相对标准偏差为3-14%;甲草胺、恶草酮、仲丁灵及甲氰菊酯在5-500ng/g的添加浓度下,平均添加回收率为88-108%,相对标准偏差为2-9%;异丙甲草胺及联苯菊酯在2.5-250 ng/g的添加浓度下,平均添加回收率为81-108%,相对标准偏差为2-7%。供试农药的定量限(LOQ)为5-20 ng/g。该检测方法在准确性、精确性和灵敏度等方面均达到农药残留分析的要求。2.全国13个试验站蜜蜂样品中高效氯氰菊酯等农药残留的检测利用建立的蜜蜂中农药多残留分析方法,检测了 13个国家蜂产业体系综合试验站采集的214组蜜蜂样品的农药残留。结果表明,蜜蜂样品中共检测出5种农药,检出率从高到低依次为甲氰菊酯(14.5%)、联苯菊酯(4.7%)、高效氯氰菊酯(3.7%)、高效氯氟氰菊酯(1.9%)、百菌清(1.4%)。不同农药的检出浓度的平均值、中位值、最大值存在差异。检出浓度最大值最高的农药是甲氰菊酯(835.4ng/g),而检出浓度平均值和中位值最高的农药为高效氯氟氰菊酯。检出浓度的中位值从高到低依次为高效氯氟氰菊酯(144.5 ng/g)、高效氯氰菊酯(94.4 ng/g)、联苯菊酯(63.9 ng/g)、百菌清(27.2 ng/g)、甲氰菊酯(14.5 ng/g)。3.4种拟除虫菊酯类杀虫剂对意大利蜜蜂和中华蜜蜂的急性毒性选取蜜蜂样品中检出率较高的4种拟除虫菊酯类杀虫剂,采用经口饲喂法测定了4种农药对意大利蜜蜂和中华蜜蜂的急性毒性差异。结果表明,4种拟除虫菊酯类杀虫剂对2种蜜蜂的急性毒性均为高毒。其中毒性由高到低的农药依次为高效氯氰菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、联苯菊酯。4种杀虫剂对意大利蜜蜂的LD50值均大于其对中华蜜蜂的LD50值,其中甲氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、联苯菊酯对意大利蜜蜂48 h的LD50值依次为0.2774 μg/bee、0.1509 μg/bee、0.2815 μg/bee、0.3289 μg/bee,分别是其对中华蜜蜂的LD50值的3.95、9.20、1.67和1.78倍。高效氯氰菊酯对意大利蜜蜂和中华蜜蜂的毒性差异最大。4.高效氯氰菊酯对意大利蜜蜂和中华蜜蜂体内4种酶活性的影响实验室条件下,测定了高效氯氰菊酯对意大利蜜蜂和中华蜜蜂体内AChE、GST、PPO、SOD等4种酶活性的影响。结果表明,意大利蜜蜂和中华蜜蜂对高效氯氰菊酯解毒过程中,4种酶活性的变化存在差异。随着时间的推移(2-48 h),意大利蜜蜂体内AChE活性先降低后增高,在48 h达到最大值(0.1983 U/mgprot);而中华蜜蜂体内AChE活性先增加,在12 h达到最大值(0.3880 U/mgprot),随后AChE活性逐渐降低;意大利蜜蜂体内GST活性不断增高,在48 h达到最大值(32.2454 U/mgprot),为对照组的2.048倍;中华蜜蜂体内的GST活性是先增高后降低,在24 h达到最大值(97.8175 U/mgprot),为对照组的5.211倍;2种蜜蜂体内的PPO活性和SOD活性均是先增高后降低。不同剂量高效氯氰菊酯饲喂处理意大利蜜蜂和中华蜜蜂24 h后,意大利蜜蜂体内AChE活性是低剂量抑制高剂量激活,而中华蜜蜂体内AChE活性是低剂量激活高剂量抑制;2种蜜蜂体内GST活性均是低剂量激活高剂量抑制,在LD25达到最大值;2种蜜蜂体内PPO和SOD的活性均是低剂量激活高剂量抑制。5.高效氯氰菊酯对意大利蜜蜂和中华蜜蜂的生存风险分析选取蜜蜂样品检出高效氯氰菊酯的平均浓度、中位数浓度和最大浓度分别连续饲喂意大利蜜蜂和中华蜜蜂10 d。结果表明,高效氯氰菊酯浓度越高,2种蜜蜂的存活率越低。而且在同一浓度处理下,中华蜜蜂的存活率明显低于意大利蜜蜂。采用最大浓度(0.2906 mg/L)的高效氯氰菊酯饲喂10 d后,意大利蜜蜂的存活率为40.0%,而中华蜜蜂的存活率仅为18.9%。可见,中华蜜蜂比意大利蜜蜂对高效氯氰菊酯更加敏感,中华蜜蜂的生存比意大利蜜蜂受到更大的威胁。