【摘 要】
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目的:胃癌是我国发病率最高的癌症之一,对其可能的生物标志物进行探究,可加深对胃癌发病机制的认知,并合理评估其在胃癌诊疗中的潜力与价值。长链非编码RNA（lnc RNA）被认为在众多疾病的发展包括恶性肿瘤的发生中起重要作用,它亦可作为胃癌早期诊断的分子标志物。本研究在实验组前期获得的芯片检测结果中选取未被报道过的目标lnc RNA进行进一步研究,通过扩大胃腺癌组织样本量验证其表达水平,并对其在胃腺癌
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（No.81372788）; 联勤保障部队第九〇〇医院（原福州总医院）胃癌创新团队基金（No.2014CXTD04）
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目的:胃癌是我国发病率最高的癌症之一,对其可能的生物标志物进行探究,可加深对胃癌发病机制的认知,并合理评估其在胃癌诊疗中的潜力与价值。长链非编码RNA（lnc RNA）被认为在众多疾病的发展包括恶性肿瘤的发生中起重要作用,它亦可作为胃癌早期诊断的分子标志物。本研究在实验组前期获得的芯片检测结果中选取未被报道过的目标lnc RNA进行进一步研究,通过扩大胃腺癌组织样本量验证其表达水平,并对其在胃腺癌细胞中的功能进行初步探索。方法:根据实验组前期lncRNA芯片检测结果,从中选取目标lnc RNA RP11-325L7.1进行进一步的研究。（1）通过逆转录反应及实时荧光定量PCR技术（q RT-PCR）,检测lnc RNA RP11-325L7.1在119对胃腺癌与配对癌旁非癌组织中的表达水平,并与已知芯片结果比对;收集患者基本病理信息及免疫组化标志物结果,通过统计学分析lnc RNA RP11-325L7.1的表达水平与它们之间的相关性。（2）构建lnc RNA RP11-325L7.1过表达质粒载体,质粒转染细胞后行G418抗性筛选,使得RP11-325L7.1质粒在胃癌细胞中呈稳定过表达。通过CCK-8实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移、侵袭实验及流式细胞术检测细胞凋亡,对上调RP11-325L7.1表达后细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡等细胞生物学行为进行分析。（3）通过ce RNA网络及CNC分析,对目标lnc RNA RP11-325L7.1的lnc RNA-mi RNA-m RNA作用靶点、通路与lnc RNA-m RNA的相关性进行分析。结果:（1）目标lncRNA RP11-325L7.1在表达谱芯片检测的6对胃腺癌组织中均呈显著下调表达,对119例组织样本行q RT-PCR检测后发现,与配对癌旁非癌组织相比,lnc RNA RP11-325L7.1在89例胃腺癌组织中呈下调表达,下调表达率为74.79%（89/119）,平均下调表达倍数为3.34倍,差异具有统计学意义（P<0.01）并与芯片结果一致。（2）在胃腺癌组织中lnc RNA RP11-325L7.1的表达水平与病患的淋巴结转移具有关联性（P=0.028）。（3）构建lnc RNA RP11-325L7.1过表达质粒载体,稳定转染胃腺癌细胞MGC-803和AGS后行体外细胞功能实验。实验发现过表达lnc RNA RP11-325L7.1抑制了MGC-803和AGS细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭（P<0.01）,并可促进AGS细胞的凋亡（P<0.05）。结论:LncRNA RP11-325L7.1在胃腺癌组织与细胞中均呈现下调表达;过表达lnc RNA RP11-325L7.1可抑制胃腺癌细胞MGC-803和AGS细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭并促进胃腺癌AGS细胞的凋亡。因此,lnc RNA RP11-325L7.1可作为胃癌潜在的分子标志物进行进一步的研究。
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