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目的:观察腺病毒介导鼠胰岛素样生长因子-1(rIGF-1)基因对环磷酰胺(CP)诱导的非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病早期胰岛β细胞损伤的保护作用。
方法:复苏并培养293细胞,在293细胞中扩增携有rIGF-1基因的重组腺病毒(Ad-rIGF-1)。4-5周龄雌性NOD鼠46只,随机分为:①空白对照组,②糖尿病对照(DM)组,③腺病毒空载体(Ad-eGFP)对照组,④Ad-rIGF-1组,适应喂养一周后,②-④组均给予CP腹腔注射诱导小鼠糖尿病模型,200mg/kg,每2周1次,共2次。第2次CP注射后第3天、第7天及以后每周同一时间测鼠尾静脉血糖,连续2次血糖高于16.7mol/L视为糖尿病早期成模。成模后③组给予含Ad-eGFP的重组腺病毒液0.1mL腹腔注射,④组给予含Ad-rIGF-1的重组腺病毒液0.1mL腹腔注射,①组不做任何处理。所有小鼠自由饮食,每周测定体质量、血糖,成模3周后处死小鼠,立即取出胰腺,中性福尔马林固定,石蜡包埋固定做病理切片及免疫组化观察胰腺炎症浸润程度和rIGF-1局部表达程度;留取小鼠血液标本,离心取血清,ELSIA法测定血清C肽、IFN-γ及IL-4水平。
结果:与DM组、Ad-eGFP组相比,Ad-rIGF-1组小鼠平均血糖水平、体质量变化无显著差别;胰腺切片苏木素伊红(HE)染色显示胰腺炎症浸润程度无显著差别;免疫组化显示rIGF-1在Ad-rIGF-1组胰岛局部高表达;ELISA法测得Ad-rIGF-1组与DM组、Ad-eGFP组血清C肽水平、IFN-γ、IL-4水平无明显差别。
结论:r-IGF-1基因对环磷酰胺诱导的NOD小鼠1型糖尿病早期胰岛β细胞的保护效果不明显。