【摘 要】
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目的:探究microRNA-365a-3p在腰椎关节突软骨退变过程中的调控作用,为治疗腰椎小关节骨性关节炎提供潜在的分子理论依据。方法:选取因腰椎退行性病变接受手术治疗的患者20名,
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目的:探究microRNA-365a-3p在腰椎关节突软骨退变过程中的调控作用,为治疗腰椎小关节骨性关节炎提供潜在的分子理论依据。方法:选取因腰椎退行性病变接受手术治疗的患者20名,因腰椎骨折接受手术治疗的患者10名,术前所有患者均行腰椎CT和MRI检查,采用Weishaupt等提出的关节突关节退变分级法将患者按退变严重程度依次分为2组(退变组和正常组),无菌条件下手术获取并分离腰椎关节突关节软骨组织,标本番红固绿染色处理;利用qRT-PCR观察miRNA-365a-3p在正常和退变软骨组织中的差异表达;体外培养关节突软骨细胞,用IL-1β分别做不同处理,在体外软骨细胞中转染miR-365a-3p mimic和inhibitor,通过CCK8法检测软骨细胞增殖;通过qRT-PCR及Western blot技术检测过表达和过抑制前后II型胶原,蛋白聚糖,金属蛋白酶MMP-13的差异表达。结果:联合CT、MRI评级以及病理染色(番红固绿法)将术中所取腰椎关节突软骨组织分为2组,RT-PCR检测发现miR-365a-3p的mRNA在退变关节突关节软骨组织中明显下调,具有差异表达;无菌条件下体外获取正常组关节突关节软骨细胞,用IL-1β做不同处理后,过表达和抑制转染miR-365a-3p,细胞增殖率检测发现转染mimic组软骨细胞增殖率明显上升;通过western blot和qRT-PCR技术显示相对于过抑制组,miR-365a-3p过表达组II型胶原和蛋白聚糖的mRNA和蛋白表达量明显上升,基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的mRNA和蛋白表达量明显下调。结论:腰椎关节突关节严重退变患者的软骨组织中miRNA-365a-3p的mRNA表达量显著下降;miRNA-365a-3p可以提高关节突关节软骨细胞的细胞增殖率,加强软骨基质的合成。
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