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目的:通过建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,研究丹参素钠在体内是否具有放射增敏作用并探索其机制。方法:首先,将Lewis肺癌细胞接种于小鼠右侧大腿外侧皮下建立肿瘤模型,待肿瘤长至直径0.6-0.7cm时,随机入组进行实验,将整个实验分为:空白组,单纯给药组,单纯放疗组,放疗联合药物组。其中单纯给药组分为单纯顺铂60mg/Kg组和单纯丹参素钠60mg/Kg组;单纯放疗组照射剂量分别为:2Gy,4Gy,6Gy,8Gy,16Gy,24Gy,放疗联合药物组分别为:顺铂60mg/Kg+2Gy,顺铂60mg/Kg+4Gy,顺铂60mg/Kg+6Gy,顺铂60mg/Kg+8Gy,顺铂60mg/Kg+16Gy,顺铂60mg/Kg+24Gy;丹参素钠60mg/Kg+2Gy,丹参素钠+4Gy,丹参素钠60mg/Kg+6Gy,丹参素钠60mg/Kg+8Gy,丹参素钠60mg/Kg+16Gy,丹参素钠60mg/Kg+24Gy;整个实验中顺铂作为阳性对照。放疗前半小时经小鼠腹腔单次注射丹参素钠或顺铂,并保证各组注射的药液体积均为0.2ml,空白对照组和单纯放疗组小鼠经腹腔单次注射0.2ml灭菌注射用水。将小鼠在觉醒状态下固定于特制固定盒内,固定盒下垫石蜡和油纱共2.3厘米,上盖石蜡和油纱共3.5厘米,小鼠大腿外侧肿瘤排布于两层固体水之间,放疗具体方式:钴-60低剂量照射,SSD=80cm,常规放疗,小鼠右腿及肿瘤在照射野内,其余部分在照射野外。照射后每3天测量肿瘤最大直径及垂直径,计算肿瘤体积,根据肿瘤体积绘制肿瘤生长曲线,根据肿瘤生长曲线绘制出剂量效应曲线,计算SER值,判断丹参素钠是否具有放射增敏作用。根据上述实验过程得出丹参素钠在体内具有放疗增敏作用,并根据肿瘤生长剂量效应曲线,选择单纯放疗、丹参素钠联合放疗、顺铂联合放疗这三条剂量曲线相互平行时的照射剂量作为后续研究照射剂量,初步研究丹参素钠放疗增敏的机制。具体研究方法为:选择10Gy作为照射剂量,实验分组为:空白组,单纯放疗组,丹参素钠组,丹参素钠联合放疗组。药物组连续腹腔给药一周后采用上述方法对肿瘤进行照射,照射后2小时内,摘右眼球取血收集血清,ELISA法检测小鼠血液中血栓素B2(TXB2),6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1ɑ),计算T/P值;并剥离肿瘤组织行免疫组化检测肿瘤组织中HIF-1ɑ,VEGF,CD31。实验数据使用均数±标准差(X±S)表示,各实验组实验结果比较采用单因素方差分析,各组之间实验结果两两比较采用Tamhane’s T2检验,统计过程使用SPSS17.0统计学分析软件进行。结果:1.顺铂联合放疗SER=2.538,大于1,提示顺铂具有放射增敏作用;丹参素钠联合放疗SER=1.748,大于1,提示丹参素钠具有放射增敏作用,但是其放射增敏作用弱于顺铂。2.免疫组化检测结果以免疫组化定量指标阳性指数(即PI值)表示。a.各组HIF-1ɑ的PI值:阴性组80.143±5.445,丹参素钠组83.164±1.812,单纯放疗组50.444±1.911,丹参素钠联合放疗组28.533±1.105。丹参素钠组与阴性组之间比较P值大于0.05,无统计学意义;单纯放疗组和丹参素钠联合放疗组与阴性组比较P值小于0.05,有统计学意义;丹参素钠联合放疗组与单纯放疗组比较P值小于0.05,有统计学意义;结果提示丹参素钠能降低肿瘤组织中HIF-1ɑ,改善肿瘤组织乏氧。b.各组VEGF的PI值:阴性组35.763±1.470,丹参素钠组12.374±0.245,单纯放疗组21.192±1.002,丹参素钠联合放疗组6.442±0.986,单纯放疗组、丹参素钠组和丹参素钠联合放疗组与阴性组比较,P值均小于0.05,均有统计学意义;丹参素钠组与阴性组比较,P值小于0.05,有统计学意义;丹参素钠联合放疗组与单纯放疗组比较P值小于0.05,有统计学意义,提示丹参素钠联合放疗能抑制血管内皮生长因子的生成。c.各组CD31的PI值,阴性组3.485±0.216,丹参素钠组2.500±0.193,单纯放疗组0.524±0.070,丹参素钠联合放疗组0.024±0.003,丹参组、单纯放疗组和丹参素钠联合放疗组与阴性组比较,P值均小于0.05,有统计学意义,丹参素钠联合放疗组与单纯放疗组比较,P值小于0.05,有统计学意义,间接提示丹参素钠具有抑制血管生成的作用。3.ELISA实验结果: a.各实验组小鼠血液中TXB2测得值:阴性组155.538±158.716pg/ml,单纯放疗组255.191±175.857pg/ml,丹参素钠组221.255±164.169pg/ml,丹参素钠联合放疗组93.160±52.354pg/ml。各实验组与阴性组比较,P值均大于0.05,无统计学意义。丹参素钠联合放疗组与单纯放疗组比较,P值小于0.05,有统计学意义。提示丹参素钠联合放疗可以明显降低放疗后血液中TXB2的量,起到舒张微血管,改善微循环的作用。b.各实验组6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1ɑ)测得值:阴性组106.878±47.415pg/ml,单纯放疗组198.008±119.479pg/ml,丹参素钠组68.681±35.786pg/ml,丹参素钠联合放疗组180.148±101.752pg/ml,各实验组与阴性组比较,P值均大于0.05,无统计学意义。c.将TXB2的值除以6-keto-PGF1ɑ的值计算T/P值:阴性组1.455,单纯放疗组1.289,丹参素钠组3.22,丹参素钠联合放疗组0.517。结果提示丹参素钠联合放疗能明显减低T/P值,改善血管收缩,改善微血管循环。结论:丹参素钠在体内具有放射增敏作用,但其增敏作用弱于顺铂。丹参素钠放射增敏的机制可能为:1)抑制乏氧诱导因子(HIF-1ɑ)及血管内皮生长因子(VEGF)合成,从而抑制肿瘤血管形成;2)并通过降低血栓素B2(TXB2),减小T/P比值,改善微血管循环,通过这两方面达到改善肿瘤组织局部乏氧。