茜草的化学成分及药理活性研究

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本论文对茜草Rubia cordifolia L.的化学成分,不同极性提取物体外抑菌活性、抗氧化作用等方面进行了研究。筛化学成分方面,本文对茜草各层提取物的化学成分进行了理化检识和系统分离。化学成分的分离:将干品茜草粉碎,过20目筛,采用回流提取装置,用不同极性的有机试剂对茜草进行回流提取,各层提取3次,将合并的提取液减压、浓缩,蒸干,然后将各层粗提物通过硅胶柱层析、凝胶柱层析对化学成分进行系统分离,反复纯化,直至分离得到单体,共得到2个单体,然后用薄层层析法、核磁、紫外、红外等手段对其进行了鉴定,分别是胡萝卜苷和β-谷甾醇。本文对茜草的中小极性分子进行了系统研究,为对茜草的进一步研发提供理论基础。化学成分的理化检识:通过试剂反应与薄层层析法,了解了茜草石油醚层提取物中主要含有甾体、萜类和鞣质类成分;茜草氯仿层提取物中主要含有甾体、萜类、鞣质类和酚类成分;茜草乙酸乙酯层提取物中主要含有甾体、萜类、黄酮、生物碱和蒽醌类成分;茜草丙酮层提取物中主要含有内酯、香豆素、黄酮、皂苷、生物碱和蒽醌类成分;茜草甲醇层提取物中主要含有内酯、香豆素、黄酮、皂苷、生物碱和蒽醌类成分。茜草粗提物抗氧化活性方面,通过建立体外二苯基苦味酰基苯肼自由基(·DPPH)发生体系、超氧阴离子自由基(·O2-)发生体系和羟自由基(·OH)发生体系,研究了茜草的石油醚、氯仿等不同极性提取物对·02-、·OH及·DPPH自由基的清除作用。研究结果显示,茜草提取物对·DPPH自由基的清除率最大,其次为羟基自由基,最后为超氧阴离子。茜草的丙酮和甲醇层提取物对三种自由基的清除率都相对较好,乙酸乙酯层对超氧阴离子自由基的清除率较好;在清除·DPPH自由基方面,茜草丙酮层提取物对·DPPH的清除作用较强,当浓度为2mg/ml时,清除率为89.50%;其次是茜草甲醇层提取物,当浓度达到2mg/ml时,清除率为88.67%;羟基自由基方面:茜草甲醇层和丙酮层提取物对·OH的清除作用较强,当浓度为2mg/ml时,甲醇层和丙酮层的清除率分别为88.50%和86.87%;在清除超氧基自由基方面,各层提取物随时间的延长对·02-的清除率随之降低。相同时间下,茜草甲醇层和乙酸乙酯层提取物对·02-的清除作用较强,清除率分别可达到79.92%和67.72%。在这3种方法中,各层提取物对它们的清除作用都表现出量效关系。体外抑菌活性方面,本文还对茜草的石油醚层、氯仿等不同极性提取物进行了体外抗菌活性实验,以金黄色葡萄球菌、沙门杆菌和大肠杆菌为供试菌种,采用k-b纸片法研究了茜草的抑菌作用,实验表明,丙酮层和甲醇层的提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均有抑制作用,在相同剂量下,甲醇层提取物对3种细菌的抑制活性均强于丙酮层提取物,丙酮层提取物的抑菌能力为:沙门氏菌>大肠杆菌>金黄色葡萄球菌;甲醇层提取物的抑菌能力为:金黄色葡萄球菌>沙门氏菌>大肠杆菌。当浓度为50mg/ml时,茜草乙酸乙酯层提取物抑菌率为51.4%,与阴性空白对照组比较有极显著差异,浓度为25mg/ml时,抑菌率为37.2%,与阴性空白对照组相比有显著差异;浓度为50mg/ml时,石油醚层提取物抑菌率为25.03%,与阴性空白对照组相比有显著差异。氯仿层对3种细菌均没有抑菌作用。通过对茜草不同极性溶剂提取物的抑菌活性研究,结果表明,茜草具有抑菌活性,特别是甲醇层提取物和丙酮层提取物具有较强的抑菌活性。因此证明茜草化学成分具有抑菌作用的活性成分,为进一步研究茜草的药理活性奠定基础。
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