论文部分内容阅读
目前,对虾养殖水体富营养化严重,养殖水环境恶化导致的养殖对虾病害频发已严重威胁对虾养殖业的健康发展。其中WSSV以传染性极强,致死率极高为特点已成为最严重的虾病之一。预防、控制WSSV的暴发,已成为对虾病害领域研究的热点之一。本研究在模拟病毒和弧菌感染条件下,探讨对虾的死亡情况以及免疫应答,以期为水产病害防控提供理论基础。(1)本研究中克隆了凡纳滨对虾Toll途径进化保守信号介导因子(LvECSIT)基因,全长1483 bp,编码311个氨基酸;Lv ECSIT在进化上与日本囊对虾ECSIT基因最接近,其次是昆虫等节肢动物,与牡蛎和贻贝软体动物进化距离最远;LvECSIT表达不具有组织分布特异性,在肝胰腺、肠和鳃组织中表达量较高;WSSV单独感染不能诱导LvECSIT的表达,副溶血弧菌单独感染及副溶血弧菌和WSSV的合并感染可以刺激LvECSIT的表达,合并感染条件下LvECSIT的表达量总是高于WSSV的单独感染。(2)本研究中克隆了凡纳滨对虾黏着斑激酶(LvFAK)基因,全长4919 bp,编码1012个氨基酸;Lv FAK在进化上与日本囊对虾FAK基因同源性最高,相似度达96%;LvFAK表达不具有组织分布特异性,在眼组织中表达量最高,肌肉组织中表达量最低;WSSV单独感染、副溶血弧菌单独感染与副溶血弧菌和WSSV的合并感染都可以刺激LvFAK的表达。(3)在26℃养殖条件下,采用WSSV与副溶血弧菌单独、合并感染凡纳滨对虾,记录累计死亡率等指标。研究表明,合并感染条件下96 h累计死亡率要低于WSSV的单独感染,且差异显著(P<0.05),副溶血弧菌单独感染对机体造成的累计死亡率最低;相同时间点合并感染对虾WSSV携带量总是低于WSSV单独感染10倍左右;弧菌单独感染与副溶血弧菌和WSSV的合并感染对虾鳃、肝胰腺和肌肉组织中的ACP、AKP、POD、SOD活力总是高于WSSV单独感染,弧菌的感染对ACP、AKP、POD、SOD活力有一定的诱导作用。