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目的:研究中国山东地区先天性甲状腺功能减退症（Congenital hypothyroidism,CH）伴甲状腺肿大患儿双氧化酶1（DUOX1）基因突变的类型及特点,并对突变CH患儿的临床表型进行确认,建立基因型与表型的关系。对本次研究发现的DUOX1基因突变及前期工作中发现的双氧化酶成熟因子1（DUOXA1）基因突变进行功能学研究,从而阐明DUOX1/DUOXA1基因突变导致CH的致病机理。方法:选取43例甲状腺肿大的CH患儿及100例正常对照新生儿作为研究对象,提取其外周血基因组DNA,采用PCR及一代测序的方法,对DUOX1基因全部外显子进行突变筛查。对本次研究发现的DUOX1基因突变（c.3910G>A,p.R1307Q）及前期工作中发现的DUOXA1基因突变（c.166C>T,p.R56W）进行功能学研究。首先,构建DUOX1、DUOXA1野生型及突变型真核表达载体,提取质粒并转染Hela细胞。利用q-PCR及Western-blot技术从m RNA及蛋白水平上检测DUOX1/DUOXA1基因突变对DUOX1基因m RNA及蛋白表达的影响。其次,利用多功能酶标仪检测重组质粒转染Hela细胞48h后过氧化氢（H2O2）的生成量,判断DUOX1/DUOXA1基因突变对DUOX1酶活性的影响。最后,重组质粒转染Hela细胞24h后加入放线菌酮（Cycloheximide,CHX）,CHX加入后的24h内选取4个时间点分别检测细胞内DUOX1蛋白的含量,计算DUOX1蛋白的降解速率来判断DUOX1基因突变对其蛋白稳定性的影响。结果:在43例伴甲状腺肿大的CH患儿中,发现1例患儿带有DUOX1杂合错义突变（c.3910G>A,p.R1307Q）,且携带该突变的患儿表现为轻度的暂时性甲低。前期工作中发现的DUOXA1杂合错义突变（c.166C>T,p.R56W）,携带该突变的患儿表现为永久性甲低。功能学研究表明,DUOX1基因突变并未改变DUOX1蛋白的稳定性,但DUOX1/DUOXA1基因突变均导致DUOX1蛋白表达量减少,DUOX1酶活性下降。此外,与同时转染野生型DUOX1/DUOXA1质粒的Hela细胞相比,转染突变型DUOXA1质粒或同时转染突变型DUOX1/DUOXA1质粒的Hela细胞,产生H2O2的能力显著下降,证实DUOXA1在DUOX1催化合成H2O2的过程中起到辅助作用。结论:43例甲状腺肿大的CH患儿中有1例患儿带有DUOX1基因杂合错义突变（c.3910G>A,p.R1307Q）,但DUOX1基因突变率低,可能不是中国山东地区CH伴甲状腺肿大患儿发病的主要因素。对该突变及前期工作中发现的DUOXA1基因杂合错义突变进行功能学研究,研究表明DUOX1/DUOXA1基因突变均造成H2O2生成能力部分丧失,甲状腺激素合成不足,促甲状腺激素反馈性增加,刺激甲状腺滤泡上皮细胞,临床上表现为先天性甲减伴甲状腺肿大,且DUOXA1在DUOX1催化合成H2O2的过程中起到辅助作用。此外,携带DUOX1基因杂合错义突变的CH患儿临床表现为暂时性甲低,携带DUOXA1杂合错义突变的CH患儿临床表现为永久性甲低,但是由于目前CH相关的DUOX1/DUOXA1基因突变报道较少,尚不能得出基因型与表型关系谱。