典型地域大气细粒子对细胞毒性和气道损伤的研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianzhu119
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我国经济欣欣向荣,工业化和城市化进程越来越快,这给环境造成了严重的污染,其中,大气污染更是严重影响着人们健康,应引起我们的重视,已成为威胁人类健康的主要因素之一。大气颗粒物对人体健康的影响非常重要,对人类健康构成极大威胁,是近年来大气污染研究关注的焦点。大气细粒子(particulate matter),特别是可入肺颗粒物(颗粒物直径小于等于2.5微米,PM2.5),越来越成为研究颗粒物对人体健康影响的关键问题。本研究主要探讨大气细粒子对细胞毒性及气道损伤的作用。本研究用玻璃纤维滤膜采集了山东省济南市的粒径在2.5微米的大气颗粒物,用超纯水超声法提取其全颗粒物并配制成不同浓度,以体外培养的人肺上皮细胞(Human lung epithelial cell s)为研究对象进行染毒处理,并探讨不同浓度的颗粒物对人肺上皮细胞的毒性作用。采用MTT比色法测定细胞的存活率,比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶(LDH)活性;利用X-Gal染色检测细胞的衰老,利用荧光探针DCFH-DA进行细胞内活性氧生成的检测。动物模型采用Wistar大鼠,随机分为四组,每组6只,分别为对照组(生理盐水)、低剂量组(2.5 mg/kg),中剂量组(5.0mg/kg)和高剂量组(10.0mg/kg),采用一次性气管滴注染毒法对4组大鼠进行不同浓度的PM2.5肺部染毒,以1 ml/kg作为滴注量标准,染毒结束24小时后处死实验动物,取左肺组织,制作病理切片并观察病理学改变,同时制备右肺的支气管肺泡灌洗液(BALF),对BALF中的免疫细胞分类计数,同时以荧光显微镜检测肺细胞活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位(MMP)的变化,研究大气细粒子对气道急性损伤的作用。结果显示:(1)不同浓度PM2.5对人肺上皮细胞作用24h后,细胞增殖受到影响。PM25低浓度时促进细胞增殖,而高浓度时抑制细胞增殖,当PM2.5的浓度较高时,对细胞的毒性作用明显;随着PM2.5浓度的升高,细胞乳酸脱氢酶(LDH)的活性也呈上升趋势,且具有明显的剂量-效应关系;另外,高浓度的PM2.5对细胞衰老有促进作用。(2)细胞内活性氧(ROS)水平随PM2.5浓度的升高呈持续上升趋势,表明高浓度的PM2.5能诱导细胞发生氧化应激。(3)肺泡灌洗液中免疫细胞分类计数结果显示中性粒细胞明显增多,吞噬细胞数量下降,表明高浓度的PM2.5能引起机体的急性炎症反应;大鼠肺细胞检测结果显示,活性氧含量随PM2.5浓度的升高而明显增加,线粒体膜电位呈降低趋势。 (4)实验结果表明,染毒组部分动物的肺组织肺间质变宽变厚,肺间质与肺实质随着染毒剂量的加大出现不同程度的炎症反应和病变,程度呈加深趋势。
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