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在中国结肠癌是常见的恶性肿瘤，肿瘤干细胞学说提出结肠癌干细胞是结肠癌发生发展的关键。基于分子标志物的结肠癌干细胞鉴定和筛选是近年来该领域的热门研究方向。目前已经报道的结肠癌干细胞分选标记有CD133、CD44、CD166、Lgr5和ABCG2等，主要是研究这些标记物筛选出来的细胞是否具有干性，但是这些标记物如何促进肿瘤的形成或本身受哪些因素的调控尚不完全清楚。 本课题研究发现，在结肠炎症、腺瘤和腺癌等病变中，结肠癌干细胞三个经典的标记物CD133、ABCG2和Lgr5在高度增生的腺体细胞表达，在腺癌细胞的表达强度与肿瘤的分化程度成正比。生物信息学软件预测发现三个结肠癌干细胞标记物的3UTR区或编码区都有miR-142-3p的结合位点。WesternBlot检测发现过表达miR-142-3p不仅能够下调结肠癌细胞内源性三个标志分子的表达，也能使外源性三种蛋白质表达下调。反之，该小分子抑制物显著上调CD133、ABCG2和Lgr5的表达，证明CD133、ABCG2和Lgr5这三个结肠癌干细胞标记物是miR-142-3p的下游调控靶蛋白。 为进一步明确该小分子和三个标记物的关系，我们在连续组织切片中检测了它们在结肠癌组织的表达情况，发现miR-142-3p与三个标记物的表达显著负相关，miR-142-3p与结肠癌的分化程度和肿块大小负相关。此外，对孕15天的SD胚胎鼠及成熟的SD大鼠结肠组织中的miR-142-3p检测发现，孕15天的胚胎鼠肠段该小分子表达量明显低于成熟的肠组织。该小分子的表达量与结肠的发育程度正相关。在结肠癌细胞系中，miR-142-3p也处于较低水平，而且与结肠癌细胞系克隆形成能力及克隆形成大小呈正相关。通过无血清低吸附的方法富集Caco2细胞中具有干性的细胞球，Realtime检测发现miR-142-3p表达下调。这些结果都说明miR-142-3p在结肠细胞的干性调控中发挥重要作用。 已知CD133、ABCG2和Lgr5分别通过不同的途径与肿瘤干细胞的恶性增殖及耐药相关，为证明miR-142-3p通过下调上述干性靶蛋白抑制结肠癌细胞增殖、提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，我们在三个标记物都表达的结肠癌细胞系中过表达miR-142-3p，发现三种蛋白质表达显著抑制的同时，伴随结肠癌肿瘤细胞cyclinD1的下调、细胞周期阻滞在G1期、细胞增殖抑制及细胞耐药性的降低。本研究还发现，该小分子本身又受到了干细胞相关的转录因子OCT4、c-myc、Klf4、SOX2的强力下调。 本课题不仅探讨miR-142-3p下游作用的靶蛋白，同时也分析了它的上游调控因子，绘制出新的以miR-142-3p为中心的结肠癌细胞干性相关的网络信号调节通路。通过以上研究结果，我们得出结论，干性转录因子/miR-142-3p/三种肿瘤干性标志分子调控网络在结肠粘膜上皮发育过程中发挥重要作用，这一调控网络的异常可能是结肠癌发生的关键分子事件之一，miR-142-3p有望成为新的结肠癌诊断标记物及治疗的靶点。