孕激素相关受体在不同肺腺癌细胞系中的表达情况

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hxhbj2009
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目的:近年来,非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer, NSCLC)的发生发展与性激素的关系越来越受到研究者的重视。雌激素能促进肺癌的发生发展,而孕激素则可通过不同受体介导对肺癌产生促进或抑制作用。本研究选取肺腺癌A549、A549/DDP(耐顺铂A549细胞)、肺腺癌PC-9细胞和PC-9/GR(耐吉非替尼PC-9细胞)进行孕激素相关受体(mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B、PGRMC1和PGRMC2)的检测及进一步分析mPRα与肺腺癌细胞耐药性之间的关系。方法:①实时荧光定量PCR (FQ-PCR)技术在mRNA水平检测7种孕激素相关受体(mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B、PGRMC1和PGRMC2)在4种肺腺癌细胞系(A549、A549/DDP、PC-9、PC-9/GR)中的表达情况;②Western Blot技术在蛋白水平检测mPRα在4种肺腺癌细胞系中的表达定量;③细胞免疫荧光技术检测mPRα在4种肺腺癌细胞系中的表达定位。结果:(1)以FQ-PCR技术在mRNA水平发现同种孕激素相关受体在4种不同肺腺癌细胞系中表达差异明显(P<0.05):mPRα和PGRMC2均在PC-9细胞中表达最高,mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B和PGRMC1均在A549/DDP细胞中表达最高,与此相对应,mPRα在A549/DDP细胞中表达最低,mPRβ、PR-A/B和PGRMC2均在A549细胞中表达最低,mPRγ、PR-B和PGRMC1均在PC-9/GR细胞中表达最低。(2)同样在mRNA水平,发现同种肺腺癌细胞内7种不同孕激素相关受体的表达差异显著(P<0.01):在A549和A549/DDP细胞中均发现mPRy表达最高、PR-A/B表达最低,而在PC-9和PC-9/GR细胞中均发现PGRMC2表达最高、PR-A/B表达最低。(3)以FQ-PCR技术在mRNA水平和Wester Blot技术在蛋白水平均发现肺腺癌耐药细胞株(A549/DDP. PC-9/GR)分别与母株(A549、PC-9)相比其mPRa表达均有下降。(4)细胞免疫荧光显示4种肺腺癌细胞在形态学上均可见明显的mPRa表达,且高倍镜下显示其表达定位于细胞膜。结论:①7种孕激素相关受体(mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、 PR-B、PGRMC1和PGRMC2)在4种肺腺癌细胞系(A549、A549/DDP、 PC-9、PC-9/GR)中均有表达;②在mRNA水平,同种孕激素受体在不同肺腺癌细胞系中表达差异明显,且同种肺腺癌细胞系内不同孕激素受体表达差异显著;③肺腺癌细胞中mPRa的表达与耐药性相关;④mPRa在4种肺腺癌细胞中的表达定位于细胞膜。
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