论文部分内容阅读
研究背景急性淋巴细胞白血病（acute lymphoid leukemia，ALL）是儿童时期最常见的血液肿瘤，占儿童白血病的70%左右，目前发病机制尚不明确。而有研究发现控制生物节律的内在生物钟基因表达异常与肿瘤的发生相关，在急慢性髓系白血病及非霍奇金淋巴瘤中都有检测到钟基因表达异常。现有关钟基因表达与急性淋巴细胞白血病发病关系的研究较少见。研究目的通过对急性淋巴细胞白血病患儿生物钟基因Bmal1、Per2基因表达的检测，探讨生物钟基因在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达，初步揭示钟基因在急性淋巴细胞白血病发病中的作用。研究对象和方法1.选择郑州大学第一附属医院儿童血液科ALL初诊未治疗患儿30例为实验组1（ALL初治组），ALL化疗完全缓解患儿30例为实验组2（ALL-CR组），体检中心体检儿童30例为健康对照组。实验组入选标准参照2006年“儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议（第3次修订草案）”诊断分型标准，实验组和对照组均排除肥胖、心血管疾病、肿瘤及睡眠周期紊乱等影响钟基因表达的疾病。2.于晨06:00用无菌注射器分别抽取实验组和对照组空腹静脉血各2ml，并迅速打入EDTA抗凝管中，轻轻摇匀。3.应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，吸取白膜层。4.按照Trizol试剂说明书提取外周血单个核细胞总RNA，检测RNA的纯度及完整性；应用反转录试剂盒合成cDNA；采用Real-time PCR测定Bmal1mRNA、Per2mRNA的表达。结果1. ALL初治组患儿Bmal1mRNA、Per2mRNA表达与健康对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），ALL初治组患儿Per2mRNA表达量水平均较对照组减低，Bmal1mRNA表达水平均较健康对照组增高。2. ALL-CR组患儿Bmal1mRNA、Per2mRNA表达与健康对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），ALL-CR组Bmal1mRNA、Per2mRNA表达均较健康对照组减低。3. ALL-CR组患儿Bmal1mRNA、Per2mRNA表达与ALL初治组比较，差异有统计学意义（P<0.05），ALL-CR组Bmal1mRNA、Per2mRNA表达均较ALL初治组减低。结论1.在儿童ALL外周血单个核细胞中存在生物钟基因Bmal1mRNA、Per2mRNA异常表达,表明其可能在儿童ALL的发生、发展中发挥一定作用；2.化疗药物应用可影响钟基因的表达。