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毒死蜱是一种常用的有机磷杀虫剂,广泛应用于害虫防治;镉则是环境中的重金属污染物,很容易在土壤及农作物中蓄积。这两种化学物可对昆虫形成联合暴露,所产生的毒性效应与杀虫剂单独施用后对害虫的防控效果可能有所不同。通过代谢组学研究机体整体的代谢物的变化,寻找毒性特异的生物标志物,从新的角度揭示杀虫剂的毒性效应及作用机制。 本研究以小菜蛾幼虫为研究对象,通过不同剂量的毒死蜱(3、6μg/头)和氯化镉(17.5、35μg/头)单独及联合染毒48 h,发现两种化学物对幼虫死亡率的影响呈现拮抗的作用。检测毒死蜱与氯化镉单独及联合染毒12h后幼虫的生化指标发现两种化学物均会引起机体的氧化损伤,对脂质、蛋白质过氧化程度及抗氧化酶活性的影响呈现拮抗的作用。通过基于气相色谱-质谱联用的代谢组学分析发现,毒死蜱与氯化镉可导致幼虫机体氨基酸及能量代谢的紊乱,天冬氨酸、酪氨酸、赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、葡萄糖醇可作为毒死蜱对昆虫毒性的生物标志物,木糖醇、甘氨酸、2,3,4-三羟基丁酸、D-赤藓呋喃糖可作为氯化镉对昆虫毒性的生物标志物,D-呋喃半乳糖可作为毒死蜱与氯化镉对昆虫联合毒性的生物标志物。另外毒死蜱与氯化镉对缬氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、酪氨酸、色氨酸、苹果酸、丁酸、α-甘油磷酸、戊二酸、脱氧核糖的代谢水平影响呈现拮抗作用。两种化学物联合染毒与单独染毒引起的代谢物水平不同。 用果蝇S2细胞进行体外实验对上述整体毒性做进一步验证,不同浓度的毒死蜱(50、100μmol/L)和氯化镉(10、20μmol/L)单独及联合染毒24 h,均可引起细胞活力抑制、脂质及蛋白质过氧化、抗氧化酶活性抑制,联合处理呈现拮抗的作用。两种化学物对活性氧自由基(ROS)的诱导亦呈现拮抗效应,ROS的变化可能是杀虫剂毒死蜱与重金属镉联合染毒产生拮抗性细胞毒性的关键因素。 模拟实际环境中镉污染土壤生长的植物被小菜蛾幼虫侵染后施用毒死蜱(相当于重金属与杀虫剂的联合暴露)发现,幼虫摄入镉会一定程度上减弱毒死蜱的杀虫效果。所有的研究结果表明,毒死蜱和镉对于昆虫具有特定的联合毒性,并且提示在施用农药时应考虑环境污染物对农药毒性的影响。