【摘 要】
：
本文运用尿素法和SDS法自坛紫菜丝状体和叶状体提取DNA，用CTAB/NaCl溶液去除剩余的多糖，反复多次，能纯化得到高质量的DNA，经紫外分光光度计检测，OD260/OD280值为1.84～1.93之间，琼脂
论文部分内容阅读
本文运用尿素法和SDS法自坛紫菜丝状体和叶状体提取DNA，用CTAB/NaCl溶液去除剩余的多糖，反复多次，能纯化得到高质量的DNA，经紫外分光光度计检测，OD260/OD280值为1.84～1.93之间，琼脂糖凝胶电泳可知大小为23kb左右，可用于坛紫菜DNA质粒文库的构建、酶切反应和SSR-PCR扩增。
用限制性内切酶Sau3AI处理提取的丝状体DNA后，选择性回收300～900bp的片段，然后将这些小片段DNA连接至经BamHI酶切并经细菌碱性磷酸酶(BAP)去磷酸化处理后的pUC18质粒载体上，最后转化至大肠杆菌(Escherichiacoli)JM109感受态细胞中，从而构建了坛紫菜部分小片段DNA质粒文库。经蓝/白斑筛选，获得384个白色克隆；选用pUC18质粒的通用引物(5-GTAAAACGACGGCCAGT-3，5-CAGGAAACAGCTATGAC-3)进行PCR反应来对这些阳性克隆进一步筛选并检测插入片段的大小，其中278个含有大小合适的插入片段。将含有300～900bp之间插入片段的克隆送交测序，并利用网络在线软件进行序列分析，在坛紫菜中获得172个微卫星序列，分别分布于103个不同的阳性克隆中。
在发现的微卫星序列中选取了32条微卫星序列设计了引物，然后进行SSR-PCR扩增。SSR-PCR优化反应体系为：0.4μM引物，200μMdNTPs，1.5mMMg2+，1UTaqDNA聚合酶，30ng左右模板DNA；优化反应程序：94℃预变性5min后进入循环体系，94℃变性30s，50～54℃退火30s，72℃延伸1min，进行40个循环；72℃延伸7min。在9对能够扩增出产物中，其中有7对适合进行微卫星分析。
其他文献
党的十一届三中全会以后,邓小平反复强调,发展社会主义民主必须依靠共产党的领导,决不能把这二者对立起来.他指出:“中国由共产党领导,中国的社会主义现代化建设事业由共产党
本文测定了斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)对白鱼粉、红鱼粉、大豆粕、花生麸和饲料酵母等5种常用饲料原料的干物质、粗蛋白、粗脂肪、总能、氨基酸和脂肪酸的表观消化率。
过河西征 作战被俘 1936年10月,红九军教导师师长陶勇率部西渡黄河,参加了西路军的艰苦作战。11月13日,九军二十七师八十一团袭击古浪县城,军主力乘机进驻城内。16日拂晓,即
本文主要用条浒苔(Enteromorphaclathrata)为材料，应用胶体金标免疫电镜分子定位技术，研究了外界因子对光合作用第一个关键酶核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Ribulose1,5-Bisph
该文以南海的各种环境和资源要素作为研究对象,从软件工程的指导思想出发,以组件式GIS软件MapX4.0和面向对象的可视化编程工具Visual Basic6.0和Matlab5.3构架的技术体系为基
This study investigates condition-based switching and replacement policies for a two-unit warm standby redundant system subject to non-instantaneous switchover.
改革开放以来，中共福建省委针对非公有制经济发展迅速的实际，坚持把加强非公有制经济组织党建工作摆在重要位置，采取有力措施，探索出了一条颇具特色的新路子。主要做法是：加强领导
论文以鄂尔多斯盆地西缘上古生界为例，展开对碎屑岩致密储层的研究。主要从岩心观察入手，充分利用岩心资料，应用常规薄片、铸体薄片、物性测试、扫描电镜等多种分析方法，对鄂尔多
我厂是一个年入洗原煤360万t的大型选煤厂,设备齐全,大型设备多,因其工艺特点,机械设备运转时产生的噪声污染非常严重,极大地影响着安全生产和工人的身心健康,为此工程技术人
在当前的古典诗词教学中，出现了一种惯常性教法：先解释字、词、句及相关典故，然后分段分层，分析诗词中的“意象”、“意境”、“修辞手法”，接下来再借用西方的文学批评理论（如解构主义、叙事学、新批评等）进行一番阐释。这样的诗词教学给人留下的印象是：教师知识渊博，讲解细致，“知识点”明晰。事实上，其效果并不佳：教师对诗词的解析支离破碎，学生虽然掌握了很多所谓的“知识点”，却未必真正感受到诗词之美，而且，用