近年来,随着人们生活方式和饮食模式的变化,肥胖、高血脂、糖尿病、代谢综合征等慢性病发病率呈上升趋势。大量临床调查数据表明,肥胖等慢性病常伴随有非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发生。NAFLD是一种慢性代谢疾病,早期NAFLD是可逆转的肝脏单纯脂肪沉积,如果不及时进行干预,则可能由单纯性脂肪肝逐渐发展为脂肪性肝炎、肝纤维化及肝硬化,甚至发展为肝癌。而随着肥胖等慢性病发病率的迅速升高,NAFLD发病率也逐年增加,已成为世界范围内的公共健康问题。目前,针对此病尚缺乏有效的治疗方法,因此,有效预防其发生发展具有重要的现实意义。目前,关于NAFLD的发病机制普遍认可的是“二次打击”学说,即以脂质沉积及胰岛素抵抗为主的一次打击和以氧化应激、炎症反应为主的二次打击。脂代谢中脂肪酸(FFA)与甘油三酯(TG)与NAFLD的关联研究较多,而胆固醇代谢异常与NAFLD的关系研究较少。植物甾醇(phytosterol,PS)是广泛分布于植物界的甾体化合物。已有研究表明,PS及植物甾醇酯(phytosterol ester,PSE)具有降胆固醇、抗氧化、抗炎症等活性。根据NAFLD的发病机制,我们推测PS(PSE)对NAFLD具有一定的预防作用,但相关研究尚不多见。本实验以雄性Sprague Dawley(SD)大鼠为研究对象,首先利用高脂饮食诱导建立NAFLD大鼠模型(HF组),同时给予不同浓度的PSE(低[PSEL]、中[PSEM]、高剂量[PSEH]分别为0.05g/100g BW,0.10g/100g BW及0.15 g/100g BW)。实验首先观察PSE对血脂四项、血糖、肝功能、肾功能等血生化指标;其次就pse对肝脂质(tc、tg、ffa)含量、肝组织抗氧化指标(sod、gpx、cat、xod活性及mda含量)及血清细胞因子(tnf-α、tgf-β、il-6、il-10、leptin及adiponectin)等的影响进行研究;利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,he)染色观察肝组织病理学变化;在此基础上利用实时荧光定量pcr技术,检测lxrα、elovl2、srebp-1等基因的mrna表达水平,初步探讨pse对nafld发挥预防作用的分子机制。实验结果如下:首先,血清及肝组织生化指标结果显示,与hf组相比,低剂量pse(psel,0.050g/100gbw)能够使nafld大鼠血清ldl-c降低13.6%(p<0.05),增加pse剂量不能使ldl-c进一步降低,各剂量pse对血清tc、tg、hdl-c无显著影响;低、中、高剂量pse对肝脏脂质(tc、tg、ffa)水平均有显著降低作用(p<0.05),且ffa浓度与正常组相近;病理切片结果显示各剂量pse干预,可使nafld大鼠肝组织脂肪变性程度减轻,肝功能得到改善,表现为pse干预组ast、alt及alp活性均不同程度的降低,其中,psel组降低程度分别为10%、5%、7%。此外,实验发现psem及pseh组大鼠血糖水平较hf组显著下降(p<0.05),且达到正常组水平。总之,本部分研究结果表明,pse可降低血ldl-c及肝脂质含量,减轻高脂饮食诱导的肝细胞脂肪变性,改善肝功能。此外,pse能够调节血糖水平,对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗也有一定改善作用。其次,肝组织抗氧化指标检测结果表明,与hf组相比,psel组大鼠肝组织sod活性升高9%,xod活性降低17%,mda浓度降低19%,各pse干预组之间无显著差别,说明pse对高脂饮食诱导的nafld大鼠肝组织氧化应激状态也有一定的改善作用。再次,关于血清细胞因子的实验结果表明,本实验中不同浓度的pse均能降低血清促炎症因子tgf-β、il-6及il-10水平,在psel组,分别降低了35%、10%、26%(p<0.05)。此外,psel干预后,tnf-α也表现出降低趋势,但对Leptin及adiponectin的影响不大(p>0.05)。增加PSE剂量未见剂量效应。本部分实验结果表明PSE可通过降低部分促炎症因子的表达,延缓或减轻NAFLD向NASH的发展。最后,实验还对脂代谢相关基因mRNA表达水平进行分析,结果表明,PSEL干预后,肝组织LXRα、ELOVL2基因表达水平较HF组均有所上调,但对SREBP-1的表达水平无明显影响(p>0.05);而PSEM、PSEH组SREBP-1表达水平显著上调(p<0.05)。此结果一方面提示PSE可通过调节脂代谢相关基因的表达,发挥对NAFLD的预防作用,另一方面,不同剂量PSE的作用靶基因可能有所不同,相关机制尚需进一步研究。本研究不仅丰富了PSE的生物学活性研究,也对NAFLD的防治提供了一定的理论依据。