氡和铅的三联体等功能核酸适配体构象变化荧光传感检测新方法

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氡(222Rn)是一种存在于许多生活环境和职业场所中具有放射性的惰性气体,世界卫生组织将氡归为19种致癌物质之一。高浓度的氡会引起白血病、肺癌、不孕不育、基因异常和胎儿畸形及其他疾病。因此,检测环境中的氡具有非常重要的意义。目前氡的检测方法主要是应用物理学和化学计量方法对氡浓度进行检测,但是氡浓度波动大,每小时都有变化,并且存在子体干扰,采样时间过长,环境等因素影响检测方法。所以建立一种操作简单,成本低廉,灵敏度高,结果稳定可靠且干扰小的氡辐射剂量检测新方法具有研究意义。本文第2章基于子体铅诱导三联体构象改变的氡辐射剂量检测新方法。在这项研究中,用稀醋酸采集氡衰变产生的稳定子体铅;合成了一种三联体分子结构(THMS)的核酸适配体传感器;建立了一种对放射性气体氡和铅快速、灵敏、简便的非标记核酸适配体荧光传感检测新方法。THMS对Pb2+离子非常灵敏,高选择性,性质十分稳定,并保留了原有核酸适配体的高亲和力。THMS与G-四链体荧光染料NMM结合后,荧光强度微弱。在Pb2+离子的诱导下,THMS三联体破坏,解离出来的单链Apt发生构象改变,形成G-四链体结构,并与NMM结合产生强的荧光。荧光强度的改变量分别与Pb2+离子浓度和样品溶液中氡的累积浓度呈线性定量关系。该传感器对铅离子的检出限为1.20nmol/L,对氡的检出限为302Bq·h/m3。本文第3章基于铅诱导核酸适配体133DNA链构象转变的铅和氡累积辐射非标记荧光传感检测新方法。富含鸟嘌呤的寡核苷酸单链133DNA链与荧光探针NMM不结合,体系荧光强度很弱。氡辐射衰变成稳定的子体铅,铅被吸收液吸收转变成铅离子,Pb2+离子诱导核酸适体133DNA链发生构象转变,形成稳定的G-四链体。G-四链体与NMM键合,导致体系荧光信号敏锐变化。样品溶液荧光强度与Pb2+浓度成正比,与氡辐射浓度正相关。该方法对铅的检出限为1.67nmol/L,对氡的检出限为1.19×103Bq·h/m3。该方法可以灵敏检测铅和氡,避免了辐射危害,拓展了核酸适体对放射性物质和气体的核酸适体荧光传感检测新领域。本文第4章基于铅离子诱导核酸适配体PW17构象改变的氡荧光生物传感检测新方法。该研究建立了一种非标记荧光生物传感器检测铅和氡累积辐射剂量的新方法。氡衰变产生子体铅,用稀醋酸吸收之后形成铅离子。单链PW17与荧光染料噻唑橙(TO)紧密结合产生强荧光。铅离子诱导PW17形成椅式G-四链体,与TO染料结合能力减弱,荧光强度降低。Pb2+离子浓度cPb=5.0nmol/L90nmol/L时,荧光强度下降程度(ΔF)与铅离子浓度之间呈线性关系,ΔF=1.28 cPb(nmol/L)+3.73,r=0.9964;氡累积浓度cRn=1.5×1049.0×104Bq·h/m3时,ΔF与cRn之间呈线性关系,ΔF=9.71cRn-2.28,r=0.9926;方法对铅离子和氡的检出限为2.88nmol/L和707.5Bq·h/m3
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