目的药动学与药效学结合模型是药物效应与浓度在时间轴上变化关系的一种评价方式,也是现代药物研究的一个热点方向。黄连碱是一种异喹啉生物碱,为三黄泻心汤中中药黄连的有效成分,现有报道具有杀菌、抗炎等多种药理效应。本课题组前期体外抗炎结果表明了黄连碱可剂量依赖性的抑制内毒素刺激的炎症反应,为了进一步明确其在整体动物水平的抗炎作用的量效关系以及作用时间窗,拟以体温（T）为宏观药效指标为基础,且深入开展一系列炎症因子NO、TNF-ɑ、iNOS等微观PD指标的测试,并建立基于作用机制PD指标的PK-PD模型来评价黄连碱解热、抗炎作用的相关特点。同时,比较微观与宏观指标之间所求模型参数的生物学差别及意义,为黄连碱抗炎、解热的临床研究试验提供依据。方法（1）建立空白大鼠的血浆和肺组织的方法学首先,制备肺组织和血浆样本,然后选用乙腈（A）-0.1%甲酸（B）作为流动相注入到液相系统内,Agilent Eclipse Plus C8（3.0 mm×150 mm,1.8μm）色谱柱,流速:1 mL·min^-1,紫外检测波长:345 nm,梯度洗脱程序为:0¹0 min:90%B⁶0%B;10²0 min:60%B;20²5 min:90%B;柱温40℃。（2）黄连碱对内毒素大鼠解热作用的PK-PD研究以100μg·kg^-1内毒素复制大鼠热症模型,给药组大鼠经尾静脉注射黄连碱高剂量(3.87 mg·kg^-1)或低剂量(1.93 mg·kg^-1)后,于不同时间点测量大鼠肛温,同时采集血浆样本后采用UPLC法测定血药浓度。采用Monolix软件以无协变量的群体计算法对黄连碱血药浓度与解热效应进行PK-PD模型建模、拟合与评价。（3）基于NO、TNF-ɑ等炎症因子的黄连碱抑制作用的PK-PD研究尾静脉注射内毒素(100μg·kg^-1)建立大鼠炎症模型,采用断点法分组后,注射LPS 0.5 h后尾静脉给予黄连碱注射液(7.74 mg·kg^-1和3.87 mg·kg^-1)进行药物治疗。根据不同时间点采集血浆及肺组织样本,并按照试剂盒说明书测试血浆及肺组织中NO、TNF-ɑ水平,利用蛋白免疫印迹技术分析大鼠肺中iNOS蛋白的表达情况。同时,利用超高效液相色谱测定大鼠血浆及肺组织中黄连碱的药物浓度。经数据统计及分析后,采用Monolix version 4.3.3软件应用群体方法分析,最终对黄连碱血药浓度和NO、TNF-ɑ、iNOS等药效指标进行群体PK-PD模型的建模、拟合与评价。结果（1）此色谱条件下,大鼠血浆及肺组织中小檗碱和黄连碱可完全分离开,在此条件下生物样本中的内源性物质对待测物质的测定没有干扰,表明专属性强;黄连碱的峰面积线性关系呈现良好趋势。（2）此剂量下的黄连碱注射液经过静注给药后的消除速度常数为0.395 h^-1,表明该药物具有代谢快,机体内保留时间短等特点,最终PK模型采用二房室线性消除模型、PD模型采用高斯函数作为体温改变的输入函数,选择E_max模型联结PK与PD部分。最终模型拟合较优,模型拟合所得黄连碱解热作用EC₅₀为89.7μg·L^-1、E_max为1.88℃。（3）该模型描述了TNF-α首先是在血浆中产生,并且在1 h附近达到峰值,随后于2 h从血浆扩散到肺组织中,致使iNOS蛋白在7 h时过度表达,随后肺组织中iNOS蛋白分泌转移到血浆中,致使NO在8 h时含量升高。最终黄连碱以线性方法抑制血浆中TNF-α的产生,并降低了血浆中TNF-α曲线下面积（AUC0-12 h）57.27%,并抑制了早期TNF-α的产生,进一步抑制了iNOS和NO的级联反应。结论黄连碱对内毒素发热大鼠解热作用强,效价高,体内分布小,消除快。同时,早期产生的TNF-α是晚期炎症级联的关键因素,黄连碱可以通过线性方式减少血浆TNF-α的产生,继而减少炎症模型大鼠的iNOS和NO的表达。最后,该基于生理学的群体PK-PD模型成功地解释了TNF-α和NO浓度及iNOS等炎症相关因子的滞后性。