SVF与PRP联合应用对BMSCs成骨分化影响研究

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目的:在整形外科手术中,骨缺损的有效重建仍然是临床医生面临的一项严峻挑战。然而当前仍无有效的方法能够解决此难题。再生医学的迅速发展为临床骨缺损的治疗提供新的选择,实现干细胞定向成骨分化是骨再生需解决的关键技术。在一些前瞻性的临床试验研究中,以脂肪来源血管基质成分(Stromal vascular fraction,SVF)为基础的细胞治疗以及与富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)联合应用仍处于临床前研究向临床应用转化的早期阶段,需要大规模长期随访的临床试验。于体外研究SVF与PRP对骨缺损周围骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)作用,以及两者联合对骨缺损的修复作用。研究方法:1.无菌条件下,于SD大鼠腹股沟手术切取脂肪组织,提取大鼠左心房血液样本。提取、培养SVF细胞和制备PRP。2.利用Transwell小室建立SVF与BMSCs共培养体系,探究SVF的旁分泌作用对BMSCs增殖和成骨分化效能影响,以及SVF与PRP联合应用作用。结果:1.CCK-8结果显示SVF、PRP以及SVF+PRP三组较空白对照组BMSCs于24h和48h细胞增殖率明显升高,其中SVF+PRP组增殖率最高。2.共培养2天时,PRP组和SVF+PRP组与BMSCs组相比ALP、RUNX2蛋白表达明显升高,而SVF组与BMSCs组在共培养2天时ALP蛋白表达无明显差异,RUNX2蛋白表达升高。3.共培养7天时,结果显示ALP和RUNX2蛋白在其他三组中的表达明显高于BMSCs组,且SVF+PRP组成骨相关蛋白表达最明显。结论:SVF与PRP均可促进BMSCs的增殖以及成骨分化,并且两者联合促进作用明显增强。目前我们可以认为在骨再生修复中,SVF细胞注射修复骨缺损,不仅仅由于其自身的成骨分化,同时能够促进骨缺损周围BMSCs的增殖及成骨分化。SVF与PRP联合应用达到更强的修复作用。
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