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目的：
观察nrf2基因启动子-336位点多态性对酒精性肝病小鼠感染创伤弧菌(VV)的影响及早期促/抗炎细胞因子(TNF-α、IL-10)、高迁移蛋白(HMGB1)的水平变化。
方法：
1．C57B6小鼠，300只，随机取20只正常饲养，余下280只采用酒精梯度饲养法替代水饲养，56天后随机取10只小鼠肝组织做病理，提示脂肪变性，完成酒精性肝病小鼠模型。正常小鼠中随机取10只为正常对照组(A1组=10只)，余10只腹腔注射VV（浓度为1×106cfu/ml，量为5ml/kg），制作创伤弧菌脓毒症模型(C组)，染菌后48h死亡2只（C组=8只）；270只酒精肝病小鼠随机取10只为酒精肝病模型组（B1组=10只），余下260只腹腔注射VV（腹腔注射浓度为1×106cfu/ml，量为5ml/kg），制作酒精肝病创伤弧菌脓毒症模型组（D组），染菌后48h，D组死亡59只（D组=201只），留取存活D组小鼠肝组织适量，提取DNA，采用基因测序法检测nrf2基因启动子-336位点的基因序列，分为非突变组
(-336T)(D1组=7只)及突变组(-336C)(D2组=194只)。
2．观察各组小鼠在感染创伤弧菌后的体温、呼吸、精神状态等情况的改变，光镜下观察各组小鼠肝组织病理变化，随机取酒精肝病感染VV组(D组)和正常感染VV组（C组）小鼠各10只，无菌取血后予常规血培养创伤弧菌。
3．采用基因测序法检测D组小鼠nrf2基因启动子-336位点上非突变组(D1组)与突变组（D2组）；通过WesternBlot法检测nrf2蛋白的表达；RT-PCR方法分别检测各组小鼠肝组织nrf2，HMGB1，TNF-α，IL-10基因的表达；ELISA法检测HMGB1，TNF-α，IL-10组织中蛋白的表达。
4．实验数据以中位数(Median)和四分位间距(QR)来表示，应用SPSS10.0进行统计分析，两个和多个样本比较采用非参数的秩和检验（两样本Mann-Whitney、多样本Kruskal-Wal1isH法）进行分析，P＜0.05及P＜0.05/3为差异具有统计学意义。
结果：
1．酒精肝病小鼠在感染VV后3h出现活动减少，进食饮水减少，6h后皮温升高，肢端及口唇发绀明显，精神萎靡，反应明显变慢，呼吸急促，竖毛现象，随着时间的推延，四肢远端呈暗紫色，不能承力，行走时前述症状加重，染菌后48h血培养创伤弧菌为阳性。
2．基因测序法对201只酒精肝病感染VV小鼠进行nrf2基因启动子下游-336位点进行基因序列检测，其中有7只小鼠在该位点的基因序列为A，即上游序列为T(D1组)，194只小鼠在该位点的基因序列为G，即上游序列为C(D2组)。
3．感染创伤弧菌48小时后，D1组酒精肝小鼠肝组织nrf2mRNA的表达是0.746(0.288)，D2组酒精肝小鼠肝组织nrf2mRNA的表达是0.352(0.156).与D1组比较，明显降低(P＜0.05/3)；A1组小鼠肝组织nrf2mRNA的表达是0.115(0.018)，D1组、D2组与A1组分别比较，均明显增高(P＜0.05/3)；B1组酒精肝小鼠肝组织nrf2mRNA的表达是0.173(0.053)，D1组、D2组与B1组分别比较，均明显增高(P＜0.05/3)。
4．感染创伤弧菌48小时后，D1组酒精肝小鼠肝组织nrf2蛋白的表达是3.982(2.407)，D2组酒精肝小鼠肝组织nrf2蛋白的表达是2.243(1.311)，与D1组比较，明显降低(P＜0.05/3)；A1组小鼠肝组织nrf2蛋白的表达是0.908(0.580)，D1组、D2组与A1组比较，明显增高（P＜0.05/3）；B1组酒精肝小鼠肝组织nrf2蛋白的表达是1.461(0.501)，D1组、D2组与B1组比较，明显增高(P＜0.05/3)。
5．感染创伤弧菌48小时后，D1组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10mRNA的表达是0.508(0.294)、0.399(0.137)、1.825(0.656)，D2组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10mRNA的表达是1.021(0.551)、0.699(0.166)、1.403(0.518)，与D1组比较，HMGB1、TNF-α明显增高，IL-10明显降低(P＜0.05/3)；A1组小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10mRNA的表达是0.230(0.107)、0.140(0.057)、0.338(0.121)，D1组、D2组与A1组分别比较，均明显增高(P＜0.05/3)；B1组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10mRNA的表达是0.410(0.152)、0.254(0.080)、0.637(0.157)，D1组与B1组比较，HMGB1无明显差别(P＞0.05/3)，TNF-α、IL-10明显增高(P＜0.05/3):D2组与B1组比较，HMGB1、TNF-α、IL-10，明显增高(P＜0.05/3)。
6．感染创伤弧菌48小时后，D1组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10蛋白的表达是6.24(1.64)、174.60(50.52)、57.98(19.55)，D2组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10蛋白的表达是12.89(3.74)、266.11(55.41)，41.53(8.35)与D1组比较，HMGB1、TNF-α明显增高，IL-10明显降低(P＜0.05/3)；A1组小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10蛋白的表达是2.01(1.21)、114.07(24.42)、13.97(6.45)，D1组、D2组与A1组比较，明显增高（P＜0.05/3）；B1组酒精肝小鼠肝组织HMGB1、TNF-α、IL-10蛋白的表达是6.05(1.84)、142.94(33.89)、22.54(7.58)，D1组与B1组比较，HMGB1无明显差别(P＞0.05/3)，TNF-α、IL-10明显增高(P＜0.05/3)；D2组与B1组比较，HMGB1、TNF-α、IL-10，明显增高(P＜0.05/3)。
7．光镜下A1组肝小叶完整，肝细胞条索清晰，汇管区无扩张；与A1组比较，B1组可见大量脂肪滴，空泡样和气球样改变；C组可见炎症细胞浸润，肝汇管区扩张；D组肝小叶完整性破坏，汇管区可见扩张的肝管和静脉，肝细胞条索紊乱。
结论：
nrf2基因启动子上游-336位点T→C突变使酒精性肝病C57B6小鼠体内nrf2表达明显降低，并加剧酒精性肝病C57B6小鼠在感染创伤弧菌时的炎症反应及脏器损害。为观察nrf2基因启动子多态性在酒精肝病患者感染创伤弧菌的影响，及探讨酒精肝病患者对创伤弧菌的易感机制提供了研究基础。