【摘 要】
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用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR),以人肝细胞株(L)总RNA为模板扩增了人锰超氧化物歧化酶(hMnSOD)的cDNA,重组到trc启动子控制下的表达载体pSE380及巴斯德毕赤酵母AOX1基因启
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用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR),以人肝细胞株(L<,02>)总RNA为模板扩增了人锰超氧化物歧化酶(hMnSOD)的cDNA,重组到trc启动子控制下的表达载体pSE380及巴斯德毕赤酵母AOX1基因启动子控制下的表达载体pPICINUA、pPIC9k,得到得组质粒pSE380-MnSOD,pPICINUA-MnSOD及pPIC9k-MnSOD,并分别转化至大肠杆菌及马斯德毕赤酵母.SDS-PAGE分析表明,大肠杆菌表达菌株经1m mol/1异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导5h后,可表过一单体分子量为22KD的蛋白质.表达量约为菌体总蛋白质的11.9﹪,连苯三酚法测定表明表达产物具有SOD酶活性,酶比活达到196.1U/mg.
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