肾是动物的主要排泄器官，是体内大量有害物质排除的必经之路。血液中超氧负离子等在肾中含量较高，研究表明在高压氧下猫的肾小管、肾小球发生肿胀等病变，这与超氧负离子的过量有直接关系。正常情况下机体内各器官应有相应的SOD以排除过量超氧负离子，血液、肺、肝等组织中SOD报导较多，而肾中SOD尚未见国内文献有具体报道。对它的研究将有助于肾病的诊断、治疗和动物肾的综合开发利用。本实验所做的工作主要是从牛肾中提取具有SOD活力的物质，分离纯化，并进一步研究其性质与功能，并将其与已经发现的几类SOD进行了比较。首先将通过绞碎、离心等步骤所得到的具有SOD活性的提取液进行不同温度下活力比较实验，在发现该酶有比较好的耐热性的前提下，通过选取适合温度、加热沉淀杂蛋白的方法进行初步纯化；再分别通过Sephadex G-25、Sephadex G-75、Sephadex G-100、Sephadex G-200和Sephacuyl S-100等不同型号分子筛柱进行分离，比较其效果后，利用Sephadex G-75进行进一步纯化。随后收集活性组分，上DEAE纤维素柱，分别用含0.05mol/L、0.1 mol/L、0.5 mol/L NaCl 的Tris-HCl缓冲液洗涤，跟踪收集活性组分，冷冻干燥制得干粉。在上述过程中，每一步均对其比活和活力进行同步跟踪，并<WP=53>利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳（PAGI）等方法进行纯度分析和性质测定；在进行纯化后对其进行了pH稳定性的检测。此外，由于生物体内过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶多为共存关系，在纯化过程中也对其他两种物质进行了同步的检测，以排除它们的干扰。另外，在对用同样方法所制得的成年牛肾提取物与小牛肾脏提取物就SOD的活力、性质和含量等做出比较后，初步确定其所含为同种物质，但是结果表明小牛肾脏中SOD明显低于成年牛肾，最后选择成年牛肾为主要原料进行提取纯化。对纯化后的具有SOD活力的物质进行了性质分析。首先利用了多种抑制剂对酶的作用表现来判断所带金属离子的类型，采用了紫外全扫描和可见全光谱扫描来判断其性质，并将所得结果与已知SOD物质做了比较。再利用水解、纸层析的方法对该SOD物质的氨基酸组成做了初步分析，并把用凝胶柱层析时粗测所得其分子量，与文献上的数据做了比较分析。最后，通过高效液相方法分析进一步确定了其分子量及纯度。研究结果表明，该酶部分性质类似于已知CuZn-SOD，而有些性质比较特殊。