【摘 要】
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研究目的:研究中药单体黄芩苷、葛根素和人参皂苷Rg1是否通过改变小鼠胚胎干细胞miR-290家族成员的表达影响D3系小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)的增殖能力。方法
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研究目的:研究中药单体黄芩苷、葛根素和人参皂苷Rg1是否通过改变小鼠胚胎干细胞miR-290家族成员的表达影响D3系小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)的增殖能力。方法:通过细胞计数继而计算倍增时间观察各中药单体对ESCs增殖能力的改变;进行PI染色检测细胞周期的变化;应用qRT-PCR检测原癌基因c-myc、 c-jun和c-fos以及miR-290家族中多种miRNAs的表达的改变;最后采用脂质体转染法过表达相应的miRNAs,得到gain-of-function效应,观测其对ESCs增殖能力的影响和对目的基因表达水平的影响。结果:1、黄芩苷显著抑制ESCs的增殖能力,表现为细胞倍增时间延长,以及明显的G2/M期阻滞和S期细胞减少。2、黄芩苷显著下调了ESCs中原癌基因c-jun和c-fos的表达。3、黄芩苷明显下调ESCs中miR-290家族中的miR-294的表达水平。4、miR-294过表达减少ESCs细胞倍增时间,且逆转黄芩苷导致的ESCs细胞倍增时间增加。5、脂质体转染miR-294mimic过表达miR-294使ESCs中原癌基因c-jun和c-fos的表达上调,且有效逆转黄芩苷导致的c-jun和c-fos的下调。结论:黄芩苷通过下调miR-294进而抑制原癌基因c-jun和c-fos的表达从而抑制ESCs的增殖。
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