生物碱是一类具有生理活性的物质,是许多药用植物的有效成分之一。三尖杉的枝、叶、根、种子中均含有生物碱,其中三尖杉碱型生物碱与抗肿瘤有密切关系,含量也较高,是三尖杉中的主要成分。摸索高效的三尖杉生物碱提纯分离技术对提高有限资源的利用,具有十分重要的意义。pH区带逆流色谱分离技术是在普通高速逆流色谱的基础上发展起来的,是逆流色谱的一个重要分支。本论文应用pH区带逆流色谱分离技术分离三尖杉中的生物碱,为三尖杉生物碱的分离制备打下技术基础。试验常规高速逆流色谱法分离三尖杉生物碱的效果,表明以乙酸乙酯-石油醚-甲醇-磷酸二氢钾缓冲液（pH5.6）为溶剂体系,三尖杉生物碱在1:1:1:1和1:1:1:2两科比例下的分离情况均较差。结果表明,改变溶剂的比例均难以取得较好的分离效果。以pH区带逆流色谱原理为基础,建立了一种从三尖杉生物碱粗提物中高效分离三尖杉生物碱的pH区带高速逆流色谱分离法。采用两种溶剂系统乙酸乙酯-石油醚-水和叔丁基甲醚（TBME）-水系统,均能取得良好的分离效果。采用分离柱容积400ml的高速逆流色谱仪,一次进样可分离800mg三尖杉生物碱粗提物,获得表台湾三尖杉碱、三尖杉碱、乙酰三尖杉碱3种纯度大于95%的生物碱。该方法的进一步放大,可望实现制药级规模的分离制备,有良好的应用前景。用pH区带高速逆流色谱,配合制备型高效液相色谱从三尖杉粗提物中分离获得6种生物碱,他们是:（Ⅰ）桥氧三尖杉碱,（Ⅱ）台湾三尖杉碱,（Ⅲ）三尖杉碱,（Ⅳ）表台湾三尖杉碱,（Ⅴ）丽江三尖杉碱和（Ⅵ）乙酰三尖杉碱。并用ESI-MS和¹H-NMR、¹³C-NMR对以上六种生物碱的结构进行了鉴定。对分离获得的差向异构体台湾三尖杉碱和表台湾三尖杉碱抑制肿瘤细胞的活性进行了比较研究,发现台湾三尖杉碱抑制人肺腺癌A549细胞、人白血病HL-60细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人卵巢癌HO8910细胞的活性比表台湾三尖杉碱高。