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目的:
初步探讨ALL白血病细胞系CEM、Reh、Jurkat对NK细胞杀伤敏感性的差异与其机制,为提高NK细胞杀伤ALL自血病细胞敏感性提供基础。
材料与方法:
用免疫磁珠阴性分选法分离三名健康志愿者外周血NK细胞作为效应细胞,在含5%FBS、500U/mlIL-2的SCGM培养基体外培养第0天、7天,应用CCK-8试剂盒法按照效靶比1:1,5:1,10:1,对ALL细胞系Jurkat、Reh、CEM进行杀伤实验。应用实时定量PCR方法检测JuFkat、Reh、CEM细胞上NK细胞活化性受体相关的配体MICA、MICB、ULBPI、CD155和死亡受体Fas、TNFRI、DR4、DR5的mRNA表达水平。
结果:
三种ALL细胞系对人原代NK细胞杀伤均敏感,敏感性由高至低为Jurkat>Reh>CEM(P<0.05)。在mRNA水平,与NK细胞活化性受体对应的配体和死亡受体的表达有异质性,Jurkat细胞高表达MICB及CD155,Reh细胞死亡受体DR4、DR5表达较高,而CEM细胞MICA、ULBP1、Fas及TNFRI表达较高。MICB在Jurkat细胞高农达,Reh中度表达,而CEM表达较低。在效靶比为1:1,5:1,10:1时,白血病细胞MICBmRNA的表达水平与其对人原代NK细胞的杀伤敏感性有高度正相关关系,随着效靶比的增加,相关性越姓(相关系数r分别为0.99.1.00,1.00,P<0.05)。
结论:
ALL细胞系对人NK细胞杀伤的敏感性差异与配体MICBmRNA的表达水平存在相关性,与死亡受体Fas、TNFRI、DR4、DR5的表达水平无明显相关性。