论文部分内容阅读
本试验于2007年至2009年在青岛农业大学进行,通过单株—混合系统选育出的莱阳产北沙参优良种株为试材,分别进行了北沙参盆栽基质筛选和水培试验、外植体消毒及愈伤组织诱导试验和根茎诱导不定芽分化的组培快繁等试验,并探索了影响北沙参组培及快繁的主要因素,建立了愈伤诱导及组培快繁技术体系,主要取得了以下研究成果:
1、获得了北沙参幼苗移栽的最佳基质组合,建立了静置水培技术体系
北沙参幼苗移栽的最佳基质组合为:1/3草炭+1/3细沙+1/3园土,移栽后可取得80.9%的成活率,并能有效提高地上部鲜、干重,有利于获得壮苗。用古典配方静置水培北沙参幼苗,以2cm浅液层培养效果为好,可获得单株平均幼嫩叶柄数2.4个,能维持幼苗30d生长。静置水培的培养条件为:昼温28℃,夜温20℃;散射光照射。
2、建立了北沙参组织培养接种外植体材料的优化体系和最佳消毒技术体系
以叶片为外植体,可选用田间栽培苗5月和6月萌发的幼嫩叶片以及温室盆栽苗的幼嫩叶片,以根尖为外植体可选用田间高畦栽培苗的幼嫩根尖,以叶柄为外植体可选用温室水培苗的幼嫩叶柄。用作接种外植体的栽培苗采用高效氯氰菊酯与吡虫啉交替喷施能有效降低北沙参接种叶片污染率。灭菌方式以先用75%酒精消毒20s再用0.1%升汞消毒5min,可取得接种外植体高存活率和低污染率。
3、建立了北沙参叶片诱导愈伤和根尖诱导愈伤技术体系
通过研究激素种类及配比、光照和黑暗培养条件、叶龄和接种方式,建立了叶片愈伤诱导的技术体系,即:叶片愈伤培养基为MS+6-BA1.8mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+2,4-D0.1~0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂8g·L-1。200Lx散射光培养比暗培养能明显提高叶片出愈率和愈伤生长速度。叶片正反面接种方式对刚展开的幼叶诱导愈伤无明显影响,对展开数天后的功能叶影响较大,以叶片正面向上接种效果为好。不同的激素配比及浓度对北沙参根尖诱导的效果也不同,2,4-D诱导愈伤效果好于NAA,根尖诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA2.1mg·L-1+2,4-D0.1~0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂8g·L-1,培养温度25±2℃,散射光培养。
4、建立了北沙参优良种株组培快繁技术体系
以北沙参根茎为外植体,通过对影响不定芽分化、生根的激素种类、浓度和光暗条件等因素以及影响试管苗炼苗和移栽等因素的研究,建立了北沙参优良种株组培快繁技术体系。根茎不定芽分化诱导适宜的培养基为MS+NAA0.2mg·L-1+6-BA2.2~2.4mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂8g·L-1,适宜北沙参不定芽生根的培养基为1/2MS+IBA0.2mg·L-1+蔗糖15g·L-1+琼脂6g·L-1,对不定芽带茎段切割可以显著提高转接芽的存活率,添加0.2g·L-1活性炭有利于提高单株平均生根数,促进根毛发育。采用两步法半封闭炼苗{培养基覆沙法半封闭短期(2d)炼苗结合混合基质移栽长期(10d)半封闭炼苗}效果较好,适宜的移栽基质有两种,分别是:1/3园土+1/3草炭+1/3细沙和1/3园土+1/3草炭+1/3蛭石。