肉鸡支气管栓塞是以肺水肿出血,支气管有干酪样物和气管出血为主要病变特征的呼吸道疾病。主要侵害10～30日龄肉鸡,多发生在秋冬和冬春冷热交替季节。该病发病急,死亡迅速,给肉鸡养殖业带来了巨大的经济损失。河北省为我国肉鸡养殖大省,也是支气管栓塞频发的地区。本研究对河北地区肉鸡养殖场中支气管栓塞综合征进行病原的分离鉴定并建立人工感染模型:（1）细菌分离、鉴定情况从河北省内9个主要肉鸡养殖区县的养殖场采集典型气管栓塞病料18份样品中分离17株细菌,其中单独感染大肠杆菌的样品13份,另有2份样品为大肠杆菌与沙门氏菌混合感染,大肠杆菌分离率为83.3%。利用大肠杆菌鉴定血清采用凝集试验进行血清型鉴定,除3株未能鉴定出血清型外,其他12株大肠杆菌能够检测出六种血清型（O78、O1、O2、O35、O18、O105）,其中O78为主要流行血清型,占分离菌株总数的33.3%,O1、O2、O35占比16.6%,O18、O105占比8.3%。药敏试验结果显示大肠杆菌对20种抗生素表现不同的耐药性,普遍存在多重耐药现象。采用18h肉汤纯培养经腹腔途径0.2m L/只注射C57B/6小鼠,在注射后表现不同程度的精神萎靡、被毛粗乱,24～48h出现死亡。（2）病毒分离、鉴定情况将采集病料中的肺、胰腺以及脾脏等处理后经尿囊腔途径接种9～11日龄鸡胚、经红细胞微量凝集与凝集抑制试验进行H9N2亚型禽流感病毒鉴定。同时对分离病毒进行全基因测序、小鼠致病性试验、SPF级肉鸡致病性试验和测定其半数感染量。结果从7个养殖场的样品中分离得到了病毒,经血凝和血凝抑制试验鉴定为H9N2亚型禽流感,分离率为77.8%,测定分离毒株的EID50在10-6～10-8之间。将分离毒株鼻腔途径0.2m L感染8周、SPF级C57B/6小鼠,感染后小鼠表现不同程度的精神沉郁、蜷缩和被毛粗乱,进而表现呼吸急促、呼吸音等以及部分攻毒小鼠死亡。剖检可见肺部有明显淤血、出血、水肿等情况。将肺组织固定、H.E.染色观察可见肺组织有大量液体渗入,呈现间质性肺炎和支气管肺炎。攻毒后的SPF级肉鸡未发生明显临床症状,H9N2禽流感病毒不能单独引起肉鸡发病。将分离毒株进行基因测序,并与4个H9N2亚型代表毒株的HA基因序列和8个我国普遍使用疫苗株的HA基因序列进行比对和系统进化树分析,结果显示本次分离的毒株均属Y280-like亚系分支且亲缘较近并趋于稳定,与我国常见疫苗株对比可见均在同一分支,变异程度小,新分离毒株未远离疫苗株。（3）H9N2亚型禽流感病毒与禽致病性大肠杆菌人工感染模型的建立用分离得到的H9N2亚型禽流感病毒与禽致病性大肠杆菌进行联合攻毒人工感染试验,观察临床症状、统计死亡率,对死亡鸡只进行解剖、采取肺组织、常规处理、石蜡包埋、切片、H.E.和Masson染色。结果显示,强致病力的病毒与强致病力的细菌联合感染能够引起接种肉鸡出现气喘、咳嗽等呼吸道症状,剖检发现支气管下部有明显的黄白色干酪样物,有的呈现空心的圆筒状、有的为实心柱状。肺部也出现细的柱状的干酪样物,死亡率为30%。从上述病料中分离出大肠杆菌和H9N2亚型禽流感病毒。H.E.染色和Masson染色显示肺部被大量渗出物阻塞,如脱落的上皮细胞、红细胞、炎性细胞和大量的纤维素性和浆液性渗出物,表明人工感染H9N2亚型禽流感病毒和禽致病性大肠杆菌能够复制出肉鸡发生支气管栓塞综合征,为进一步研究发病机理和干预奠定基础。