两种倍性罗汉果果实发育的生理特性及外源激素调控的研究

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本试验通过对二倍体和三倍体罗汉果果实内源激素含量变化与生长动态关系研究、二倍体和三倍体罗汉果果实过氧化物酶和酯酶同工酶分析比较、外源激素对二倍体和三倍体罗汉果果实生长特性及品质的影响以及二倍体罗汉果LFY同源基因的研究,旨在揭示两种倍性罗汉果果实发育的生理特性与激素调控效果,为指导高品质罗汉果和新品种的选育提供理论基础。总结结果如下:1在罗汉果果实发育过程中,二倍体罗汉果内源激素IAA、ZR、ABA的含量均明显高于三倍体罗汉果的,其中ABA含量最高,其含量在两种倍性的罗汉果整个生长期中都远远大于其它三种激素。两种倍性果实的IAA含量变化趋势在整个生长期差异很大,在快速生长的0-24天二倍体的IAA先迅速升高至第6天后又急速下降,三倍体的IAA则先缓慢下降至第12天时又迅速上升;GA3含量总体呈相反趋势,二倍体的GA3含量整个生长期随着果实的膨大而呈下降趋势,而三倍体的除了在0-6天下降,之后一直上升直至果实晚熟;ZR含量在前中期有明显差异但后期趋于相同,在0-24天,二倍体的ZR随着种子的生成先迅速升高然后又迅速下降,三倍体的先缓慢下降然后迅速升高;而ABA含量变化趋势基本没有差异。2试验分别对二倍体、三倍体罗汉果果实的POD同工酶和EST同工酶进行研究和分析,结果表明:两种倍性罗汉果的POD和EST同工酶差异很大,其中差异最大的是POD同工酶,所分离的条带数不同。从二倍体果实中一共分离出了9条POD酶带,其中P7、P8和P9为特异带,从三倍体果实中共分离出了10条POD酶带,其中p3、p6、p9和p10为特异带,两种倍性果实的差异带为P4、p3和p4,其中二倍体的P4对果实的膨大产生明显的促进作用;从二倍体和三倍体果实中均分离出10条不同Rf值的酶带,酶带的强弱均随着果实的发育呈下降趋势,其中E1、E3、E7、E9和E10为二倍体罗汉果果实EST同工酶的特异带,e1、e3、e5、e6、e9和e10为三倍体的特异带,两种倍性罗汉果无EST差异带,但二倍体的E2和E4在24-50天仍对果实的膨大起到较大的促进作用。3运用外源激素IAA、GA3、ZR和ABA对二倍体和三倍体罗汉果果实发育进行调控,结果如下:影响二倍体和三倍体罗汉果果实重量和甜苷V含量最显著的实验因素均分别为喷洒间隔时间和喷洒时间。生产中若以果实重量为考核指标,则对二倍体重量促进作用最佳的实验处理组合为150mg/L的ABA,一级侧蔓打顶时开始喷洒,总共喷洒1次,使果实的重量显著增加了21.18g,而对三倍体果实重量促进效果最佳的实验处理组合为25mg/L的GA3,三级侧蔓雌花授粉时开始喷洒,每隔5天喷洒1次,总共喷洒2次,使重量增加了9.74g;若以甜苷V为考核指标,则对二倍体和三倍体果实甜苷V积累效果最显著的实验处理组合均为150mg/L的ZR,二级侧蔓雌花开始发育时喷洒,每隔5天喷洒一次,总共喷洒2次,使果实甜苷V分别升高了22.65%和29.29%。4本文研究了罗汉果LFY同源基因,得到了两条分别命名为Sg1-LFY和Sg2-LFY的DNA片段。其中Sg1-LFY长973bp,包含2个外显子(369bp和340bp)和1个内含子(264bp),共编码236个氨基酸;Sg2-FLY长729bp,包含1个外显子(310bp)和1个内含子(413bp),编码101个氨基酸。经BLAST分析表明,两段序列与其它植物的同源性达到77%-97%;根据外显子序列编码的氨基酸序列进行BLAST分析,结果表明氨基酸序列与其它20种植物的LFY同源基因的同源性达高达73%-97%,说明该基因片段确实为罗汉果的LFY同源基因,也说明不同植物的LFY同源基因具有保守性,也存在差异。
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