该博士学位论文由临床研究及基础研究工作两部分组成。第一部分98例小肝癌的临床病理及预后相关分析[目的]分析小肝癌患者的临床病理特征及影响预后的相关因素。[方法]回顾性分析2009年1月至2013年12月行外科手术R0切除的98例小肝癌患者的临床病理资料,并进行完整随访。采用Kaplan-Meier法计算生存率,Logrank法进行生存曲线比较,多因素分析采用Cox比例风险模型,检验水准α=0.05。[结果]98例患者全部获得随访,98例患者术后1、3、5年生存率分别为99.0%、91.7%和76.3%,中位总生存时间(OS)为52个月。98例患者术后1、3、5年无进展生存率分别为86.7%、66.2%和55.0%,中位无病生存时间(DFS)为43.5个月。单因素分析显示,卫星结节、肝被膜侵犯和术后复发时间与OS有关(均P<0.05),长期大量饮酒、卫星结节和肝被膜侵犯与PFS有关(均P<0.05)。多因素分析显示,长期大量饮酒是影响小肝癌无病生存时间的独立因素(P=0.003),术后复发时间和肝被膜侵犯是影响小肝癌总生存时间的独立因素(均P<0.05)。分组分析影响长期大量饮酒患者及非长期大量饮酒患者的预后因素,对于无长期大量饮酒患者,术前ALT是无病生存时间及总生存时间的显著性不良因素。对于有长期大量饮酒患者,单因素分析显示卫星灶对总生存时间及无病生存时间的影响有统计学差异(P<0.05)。多因素分析结果显示:术后复发时间是影响总生存时间的独立危险因素(P<0.05)。[结论]对于小肝癌的手术治疗,在保证肿瘤R0切除的前提下,尽量减少正常肝的切除范围对患者有利。小肝癌术后复发时间≤2年提示预后不良,长期大量饮酒能够促进小肝癌术后复发。对于无长期大量饮酒的患者,术前ALT升高能够影响小肝癌术后复发。第二部分多灶与单灶肝细胞肝癌外周血白细胞基因表达谱的差异研究[目的]多灶与单灶肝细胞癌是具有不同临床表现和分子生物学特征的异质性疾病。探索多灶与单灶病变的外周血单个核细胞发生的不同分子事件,分析多灶与单灶肝细胞癌肿瘤微环境的差异。[方法]本实验收集同一治疗组治疗的15例单灶肝癌与9例多灶肝癌患者外周血,采用Agilent 4*44k基因芯片平台,检测外周血单个核细胞的mRNA表达谱,通过生物信息学分析,获得差异表达基因。[结果]通过表达谱芯片分析,在多灶与单灶肝癌外周血单个核细胞中发现592个差异表达基因。主成分分析显示,多灶性肝癌患者与单发性肝癌患者外周血白细胞基因表达谱有明显差异。GO富集分析结果显示,536个上调的差异表达基因涉及的生物学过程包括:细胞因子介导的免疫应答、细胞间的信号传导、损伤修复反应,p38MAPK信号通路的正性调控,免疫系统过程调节以及神经系统和突触的形成等。56个表达下调的差异基因涉及的生物学过程主要包括DNA的转录过程与调控、核糖体的生物合成以及胶原纤维的合成过程等。Pathway分析结果显示,上调的差异表达基因主要与以下通路相关:酪氨酸代谢过程,神经活性配体-受体相互作用,细胞的紧密连接过程,血清素突触以及矿物质的吸收等信号通路相关。样本GSVA分析显示:多灶与单灶肝癌外周血白细胞对比,筛选出有显著性差异的基因集(p<0.05)共339个,主要涉及:各种免疫细胞的功能调控(CD4T细胞,树突状细胞,CD8T细胞等),肝癌干细胞的功能,肿瘤微环境的细胞因子功能(TGF-β,IL-1,IL-6,IFN,HIF等),MAPK信号通路的调节,脂类代谢稳态与脂类合成的调节等。[结论]多灶与单灶肝癌患者外周血白细胞基因表达谱存在明显差异,多灶肝癌患者白细胞TGF-β信号通路、脂类合成过程以及HIF等促进肿瘤进展及转移的基因较单灶肝癌患者的表达明显上调,而p38/MAPK信号通路在多灶患者基因表达谱中下调。多灶肝癌较单灶肝癌在肿瘤微环境中存在更多促转移及进展的上调基因。