本研究包括两个试验:试验一,犬附红细胞体病形态学诊断方法的研究;试验二,犬附红细胞体病PCR诊断方法建立与应用。实验一犬附红细胞体形态学研究及血液学指标测定无菌采集附红细胞体感染犬的新鲜血液,用柠檬酸钠抗凝,直接涂片镜检、姬姆萨染色、瑞士染色、吖啶橙染色镜检,观察红细胞及附红细胞体的形态、运动特性;测定其红细胞总数、红细胞压积、血红蛋白含量和血清胆红素,血清谷—丙转氨酶,血糖含量。结果发现附红细胞体附着在红细胞的表面使其失去原来的形状变为环形、球形、短杆形、哑铃状或星状的闪光小体;附红细胞体单个或聚合在一起存在于血浆中作摇摆、扭转、翻滚等运动;血常规和血液生化指标测定结果显示随着附红细胞体感染强度的增加,红细胞总数、红细胞压积、血红蛋白含量下降;白细胞总数明显升高;血清胆红素,血清谷—丙转升高;血糖含量下降。实验二犬附红细胞体病PCR诊断方法的建立与应用根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630bp的基因片段,建立了犬附红细胞体PCR快速检测方法,并用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查。研究结果表明该方法只能从犬附红细胞体中扩增出约630bp的基因片段,而犬细小病毒,大肠杆菌等,扩增结果均为阴性。敏感性试验表明该方法最低可检测到10pg的DNA。利用该方法对临床上12例疑似犬附红细胞体血样进行检测,检出率75%,而直接镜检的阳性检出率仅为66.7%。这些试验结果表明,本实验建立的PCR快速检测方法灵敏、快速、特异性强,可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查。