B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen,BCMA)是在多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞和浆细胞表面上特异性表达的蛋白。研究靶向BCMA的单域抗体(Single domain antibody,sdAb),可以特异性MM细胞表面的结合BCMA蛋白;sdAb又有高水溶性、低免疫原性、较强的组织渗透力和强稳定性的特点,将在MM的特异性免疫分析和治疗中发挥作用。本试验中使用BCMA蛋白免疫双峰驼,获得重链可变区(VHH)基因库,将基因库转化到大肠杆菌TG1中,构建噬菌体抗体库进行三轮富集、淘筛,选取了 Phage ELISA鉴定出的与BCMA蛋白高结合活性的重组噬菌体。将VHH基因克隆到原核表达载体pET-25b-SBP,采用低温诱导工程菌进行可溶性表达,用镍柱对破碎菌上清进行纯化。进行ELISA鉴定,鉴定其亲和活性,试验研究结果如下:(1)免疫后测得血清抗体效价为1:16000,建立BCMA特异性噬菌体抗体库库容3.15×106,富集筛选后经Phage ELISA检测阳性重组噬菌体共有52株。(2)将VHH基因克隆入原核表达载体pET-25b-SBP,菌落PCR及表达鉴定进行高表达筛选,诱导表达得到可溶的BCMA特异性sdAb;经ELISA试验鉴定,筛选表达得到的sdAb与BCMA蛋白结合,并具有一定的亲和活性。