齐元富教授辨治肺癌临床经验及常用清热解毒药调控PI3K/AKT通路主要靶点的实验研究

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目的:通过数据挖掘技术多层次、多角度对齐元富教授治疗肺癌的处方用药进行研究,总结齐元富教授治疗肺癌的处方用药规律和相关临证经验。提取齐元富教授治疗肺癌的常用清热解毒药进行体外抗肿瘤实验研究,为中医治疗肺癌的临床疗效提供实验依据。方法:第一部分是病案研究,通过收集齐元富教授门诊及病房治疗肺癌的病案处方,采用数据挖掘技术对病案信息处理,分析患者基本信息、病理类型、症状、舌脉、病机及药物性味、归经情况,同时对处方药物进行聚类和关联规则分析,并结合相关中药的现代研究,总结齐元富教授治疗肺癌的处方用药规律,并对齐元富教授辨治肺癌临证经验进行探讨和总结。第二部分制备齐元富教授常用清热解毒药的含药血清,常规培养细胞,用CCK-8法检测人肺正常上皮细胞株BEAS-2B和两种非小细胞肺癌细胞株A549、H1299的增殖能力变化情况以明确目标药物对不同细胞的毒性作用,运用伤口愈合实验、Transwell小室侵袭实验、Real-time PCR法、Western blot法观察目标药物对肺腺癌A549、H1299细胞株的迁移、侵袭能力变化及PI3K/AKT通路中相关基因和蛋白的调控作用。结果:(1)在本次临床研究中,符合入选标准的患者共计有610例,1867诊次,肺癌的病理类型主要是肺腺癌(占48.85%)和肺鳞癌(32.95%)为主,肺癌症状中最常见的是咳嗽,其次乏力、咯痰、眠差、气短、消瘦、便溏等。以舌质淡红,苔薄、苔黄最常见,细脉、弦脉频率最高。纳入病案中痰、热、癌毒互结、气阴两虚证是肺癌患者的主要病机。齐元富教授处方用药中四气主要以寒、温、平为主,五味以苦、甘、辛三味为主,归经肺、脾、胃、肝经最多。常用清热解毒药对有蚤休、黄芩和白花蛇舌草、蛇莓和白英,扶助正气类如女贞子和菟丝子、黄芪和太子参、白术和枳壳,化痰止咳平喘类如桔梗和杏仁、白前和前胡、紫菀和款冬花、陈皮和清半夏等。(2)实验部分齐元富教授常用清热解毒药组(蚤休、白花蛇舌草、黄芩、蛇莓和白英)含药血清在正常肺上皮细胞BEAS-2B中无明显毒性作用,在非小细胞肺癌细胞株(A549、H1299)中具有成浓度依赖性的明显的毒性作用,可抑制两种肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,与顺铂联合使用具有协同增效作用;同时可调低PI3K、AKT的基因和蛋白表达水平,调高PTEN蛋白的表达水平,可能通过纠正PI3K/AKT通路紊乱,来抑制肿瘤的进展。结论:(1)基于数据挖掘技术对齐元富教授治疗肺癌进行用药规律分析,发现纳入病案中痰、热、癌毒互结、气阴两虚证是肺癌患者的主要病机。病理因素以痰、热、毒为主,病位在肺,涉及肝、脾、肾等脏腑。(2)齐元富教授治疗肺癌治疗原则是扶正祛邪,攻补兼施,在首重气阴两顾基础上,主张祛邪当予清热解毒化痰。方中祛邪药多于扶正药,总体来说“祛邪大于扶正”。以清热解毒类和止咳平喘类药物居多,总结得出清热解毒药基本核心组方由五位药组成,分别为:蚤休、白花蛇舌草、黄芩、蛇莓和白英。清热解毒治法对肺癌具有较好的抑制作用,为临床治疗肺癌提供了更多的选择。扶正补虚类药物用党参、太子参、黄芪、女贞子、菟丝子等居多,根据脏腑、气血、阴阳等不同,临证用药,随证处之。(3)以齐元富教授在治疗肺癌中常用的清热解毒药基本核心组方为切入点,采用现代研究方法证明齐元富教授常用清热解毒药具有抑制肺腺癌A549、H1299细胞增殖、迁移、侵袭的作用,其机理可能与调控PI3K/AKT通路的主要靶点有关。
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