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乳酸菌作为益生菌,在防治炎症性肠病(IBD)和保证人类健康方面具有重要的生理作用和潜在的应用价值,但其如何增强或调解机体免疫系统的机制尚不清晰。本研究首先筛选具有抗炎活性的乳酸菌用来干预健康小鼠,采用免疫磁珠法分离肠系膜淋巴结中的CD4+T细胞,应用流式细胞术检测CD4+Foxp3+Tregs对淋巴细胞、细胞因子的影响以及与树突状细胞介导能力的关系。应用乳酸菌干预啮齿柠檬酸杆菌诱导的结肠炎小鼠,采用免疫磁珠法、流式细胞术、结肠H&E染色等研究CD4+Foxp3+Tregs在小鼠肠系膜淋巴结中的数量变化,以及对炎症细胞因子的影响,阐明乳酸菌调节免疫系统发挥抗炎效应的分子作用机制,通过病理切片观察乳酸菌预防肠炎的效果,为进一步开发乳酸菌作为免疫调节剂预防IBD奠定理论基础。本研究的具体研究内容及结果如下：1.筛选抗炎乳酸菌：首先将所得5株乳酸菌通过与健康Balb/c小鼠肠系膜淋巴结中的淋巴细胞体外共培养24-72h后,应用流式细胞术检测Foxp3的表达。结果显示,单菌株中鼠李糖乳杆菌ATCC53103能够显著上调Foxp3的表达,而乳酸菌组合ATCC53103+ATCC4356+L.P A能够显著上调Foxp3的表达。2.啮齿柠檬酸杆菌诱导Balb/c小鼠建立肠炎模型应用啮齿柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium,Cr)干预健康Balb/c小鼠14天,通过流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结中细胞因子,H&E染色观察小鼠远端结肠炎症情况。结果显示,Cr干预后主要引起小鼠MLN中Thl型免疫反应,病理切片结果表明Cr感染后使小鼠远端结肠杯状细胞增多,炎性细胞浸润,肠腔内局部上皮细胞坏死脱落等显著病理变化。3.乳酸菌抗Cr肠炎的分子免疫途径研究应用所筛选出的ATCC53103+ATCC4356+L.p A混合乳酸菌干预健雌性Balb/c小鼠,连续21天,检测小鼠MLN中CD4+CD25+Foxp3+Treg及其相关因子的表达；同时检测DC的表达。应用Cr干预混合乳酸菌干预后的小鼠,检测Treg及相关细胞因子的表达,同时留取远端结肠通过H&E染色观察结肠病理变化。结果显示,混合乳酸菌能够上调MLN中Treg的表达,同时诱导脾脏和MLN中DC的成熟、分化,且混合乳酸菌能够下调Cr干预后MLN中炎症因子的表达,病理切片结果表明乳酸菌能够缓解Cr对小鼠肠道的破坏损伤。