水稻SDG711和SDG723的克隆与功能分析

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:randygu
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组蛋白甲基化修饰在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用。组蛋白的甲基化主要存在于组蛋白H3、H4氮端赖氨酸或者精氨酸残基上,且有单、双和三甲基化修饰。组蛋白甲基化修饰由组蛋白甲基转移酶催化,目前已经发现的组蛋白甲基转移酶除了H3K79的甲基转移酶DOT1和DOT1L之外,其他的均含有在进化上非常保守的SET、结构域,从而构成了SET、结构域蛋白家族(SET Domain Group,SDG)。  水稻作为模式单子叶植物,又是重要的农作物,其SDG蛋白的功能研究还少见报道。本研究以水稻SDG711和SDG723为研究对象,构建目的基因的过量表达和干涉表达载体,转化水稻,结合转化植株的分子检测和表型变化分析,以期了解SDG711和SDG723参与的生物学过程。主要研究结果如下:  (1)利用RT-PCR方法获得SDG711和SDG723基因的ORF,构建了两基因的过量表达和RNA干涉载体,并通过农杆菌介导法转化水稻粳稻品种中花11,成功获得转基因阳性植株。  (2)对转化植株进行了分子水平上的检测,以PCR扩增筛选基因结合Southern杂交的方法,筛选出阳性单拷贝植株,以其总RNA为模板进行RT-PCR半定量分析,与同期的野生型中花11相比,过量表达载体的转化植株中,目的基因的mRNA表达量明显上调,干涉载体转化植株中,目的基因的mRNA表达量则明显下调。  (3)通过分析转基因水稻表型发现,与同期野生型水稻中花11相比,过量表达SDG711基因的转化植株表现出矮化、结实率低和花序少的表型,而干涉SDG711表达的转化植株则表现出矮化、分蘖多、叶小、叶色深绿、花粉活力低和结实率低的表型;过量表达SDG723的转化植株没有明显的表型,但干涉SDG723表达的转化植株表现出从营养生长向生殖生长转变的时间推迟的现象。  (4)结合转化植株的分子检测和表型分析,初步认为SDG711参与调控水稻的株高、分蘖数、叶片大小、叶色、花粉活力等生物学过程;SDG723则可能在水稻的阶段发育过程中发挥关键作用。
其他文献
本论文的资助来源为:国家863计划重点项目“光纤偏振模色散自适应补偿技术”,编号:2001AA122041;国家自然科学基金项目“偏振模色散缓解技术与补偿技术动态结合的研究”,编号:60577046;北京市教委共建项目“高速光纤通信系统中若干重要技术的研究”,编号:XK100130537。偏振模色散被认为是限制10Gb/s以上光纤通信系统长距离传输的重要因素之一,是目前光纤通信领域的一个研究热点。
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