【摘 要】
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为了更好地对鬼笔类真菌进行培养特性和个体发育方面的研究,本文收集了山东省的超短裙竹荪Phallus ultraduplicatus、冬荪P.dongsun两个野生菌株和来自贵州省的红托竹荪P.rubrovolvatus栽培菌株。首先对三个种进行了菌丝、孢子和子实体等方面的形态学鉴定以及基于ITS序列的分子鉴定;然后再通过母种培养基初筛、单因素实验、正交实验、响应面建模优化、栽培料配方实验、栽培料碳
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为了更好地对鬼笔类真菌进行培养特性和个体发育方面的研究,本文收集了山东省的超短裙竹荪Phallus ultraduplicatus、冬荪P.dongsun两个野生菌株和来自贵州省的红托竹荪P.rubrovolvatus栽培菌株。首先对三个种进行了菌丝、孢子和子实体等方面的形态学鉴定以及基于ITS序列的分子鉴定;然后再通过母种培养基初筛、单因素实验、正交实验、响应面建模优化、栽培料配方实验、栽培料碳氮比实验、栽培出菇等实验内容,对三个种进行了培养条件优化和驯化栽培研究;最后在栽培出菇的过程中,采用石蜡切片法对三个种不同生长阶段的菇蕾进行个体发育研究。结果表明:1.三个种的菌丝都呈分枝状,有明显的锁状联合,菌丝形态有较小差异;三个种的孢子都呈椭圆柱形,超短裙竹荪的孢子较细长,冬荪和红托竹荪的孢子较粗短。三个种的子实体的主要差异在菌裙上,超短裙竹荪的菌裙质地较薄、长2~4cm、带有不规则形状的网孔;红托竹荪的菌裙质地较厚、长6~8 cm、带有圆形网孔;冬荪没有明显的菌裙。2.三个种的种属关系比较明确,超短裙竹荪与分布于辽宁的超短裙竹荪聚到一个类群,红托竹荪与贵州、湖南的红托竹荪聚到同一类群;冬荪与我国贵州、湖南及韩国、日本的冬荪聚到同一类群。超短裙竹荪和冬荪的亲缘关系较近,与红托竹荪的亲缘关系较远。3.超短裙竹荪的最佳培养条件为葡萄糖15.3 g·L-1、蛋白胨2.3 g·L-1、p H 6.5、温度26℃,培养基中添加50~150 mg·L-1的维生素B1和2.0~2.5 g·L-1的KH2PO4能够促进菌丝的生长,添加超过0.5 g·L-1的Mg SO4会抑制菌丝的生长;最佳栽培料为65%木屑、33%麦麸、1%石膏粉、1%蔗糖;菌棒覆土栽培25 d后开始出现菇蕾,55 d后子实体开始成熟,生物学效率为34%。4.冬荪的最佳培养条件为葡萄糖23 g·L-1、酵母浸粉5.3 g·L-1、p H 5.5、温度26℃,培养基中添加1.0~1.5 g·L-1的KH2PO4能够促进菌丝的生长,添加维生素B1和Mg SO4不能促进菌丝的生长;最佳栽培料为68%木屑、30%麦麸、1%石膏粉、1%蔗糖;菌棒覆土栽培40 d后开始出现菇蕾,80 d后子实体开始成熟,生物学效率为17%。5.红托竹荪的最佳培养条件组合为蔗糖、酵母浸粉、p H 5、温度28℃,最佳栽培料为58%木屑、40%麦麸、1%石膏粉、1%蔗糖;菌棒覆土栽培18 d后开始出现菇蕾,48 d后子实体开始成熟,生物学效率为40%。6.三个种的菇蕾内部发育顺序一致,发育完成的时间不同,最先发育的都是胶质腔,接着是子实层、菌柄腔、菌柄、菌盖、菌裙(菌幕);发育过程中菌丝的形态都要经过从疏松到紧密、从交织状到组织状的变化过程;在菇蕾直径相同的条件下,冬荪发育最快,在菇蕾直径为2 cm时,各器官基本都已发育完成,红托竹荪在菇蕾直径为3 cm时发育完成,超短裙竹荪的菇蕾发育最慢,在直径达到4 cm时各器官才能发育完成。对三个种的培养特性和驯化栽培研究结果能够为鬼笔类真菌在北方地区的推广栽培提供理论指导;三个种的形态及子实体个体发育研究成果将有助于鬼笔类真菌的种类鉴定和亲缘关系的探索。
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