分子伴侣在新生肽链成为功能蛋白的过程中发挥着重要作用,包括帮助新合成的肽链折叠,阻止蛋白质聚集并且能够在特定情况下介导功能丧失的蛋白质发生降解。细胞中的分子伴侣构成了一个复杂的网络体系,不同的分子伴侣协调作用,使蛋白质在细胞内处于稳定的生理平衡,保证各项生命活动的正常进行。　　Trigger factor(TF)是大肠杆菌分子伴侣体系的重要成员,是新生肽链遇到的第一个分子伴侣。TF由三个结构域组成,M端结构域具有肽脯酰胺顺反异构酶(PPIase)的活性,N端和C端结构域共同为新合成的肽链提供了一个保护区,新生肽链可以在保护区内进行折叠。TF与新生肽链之间的作用并不依赖ATP的存在也不需要辅因子的调控,通过与新生肽链周期性地结合和释放,TF能够减少了肽链不正确的折叠,提高了折叠效率。对TF的结构进行分析,发现TF的N端和C端结构域所围成的保护区内的侧面暴露着许多疏水微区,为了研究这些区域是否与TF的分子伴侣功能有关,我们拟通过定点突变的方法,改变这些区域的疏水性质,然后比较突变前后TF分子伴侣活性的差异,分析这些疏水微区在TF分子伴侣功能中的作用。本研究选取溶菌酶(Lysozyme),牛碳酸酐酶(BCAII)和甘油醛三磷酸脱氢酶(GAPDH)三种蛋白质作为TF的作用对象,检测TF突变体帮助变性蛋白质重新折叠以及阻止变性蛋白质聚集能力。实验结果显示,部分突变的位点使得TF的分子伴侣功能发生了明显的改变,但同一种突变体对于三种底物蛋白的折叠和聚集的影响却不完全一致,表明TF具有复杂的生物学功能作用机制。本研究加深了人们对TF分子作用机制的认识,为改造大肠杆菌的分子伴侣体系,提高大肠杆菌外源蛋白表达效率提供了理论基础。