论文部分内容阅读
CT-1042(4-乙基-8-氟-4-羟基-9-甲氧基-11-甲基-1,12-二氢-4H-2-氧杂-6,12a-二氮杂-二苯并[b,H]芴-3,13-二酮)是一种小分子化合物,在体外实验中表现出对许多组织来源的肿瘤细胞都有抑制活性。非小细胞肺癌(NSCLC)发病率高且后果严重,虽然已有靶向药物上市,但易发生耐药,人群适用有限,研发新型抗肺癌药物,仍是临床迫切需求。CT-1042是一种抗癌活性很强的新型喜树碱类化合物,但对肺癌细胞的作用和潜在机制却不清楚。本研究在较为系统地评价CT-1042的抗癌特点的同时,重点评价和研究了CT-1042对NCI-H460 NSCLC细胞的抗癌特性及其分子机制。本研究用MTT实验来评估细胞增生活性,并用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)和进行细胞周期分析。进行实时定量PCR和Western blotting以确定相对的mRNA和蛋白质表达水平。进行裸鼠皮下移植瘤实验以评价CT-1042对体内肿瘤生长的影响。实验证实,CT-1042明显抑制了12种肿瘤细胞的增殖,诱导了受试细胞中MMP的减少,并增加了相对Caspase-3的活性。细胞周期分析表明CT-1042以剂量依赖性效应阻滞G2/M期的细胞周期进展。此外,CT-1042通过激活p53、促进Bax、抑制Bcl-2和Survivin来诱导线粒体介导的细胞凋亡。最后,CT-1042显著抑制体内NCI-H460皮下移植瘤的生长,当前给药方案下,具有较高的安全性,毒性较低。总的来说,CT-1042具有显著的抗肺癌活性,有希望成为一种新的和高效的抗癌药物。此外,许多难治性疾病,如癌症,有非常复杂的病因,涉及多靶点多环节,只有对多个靶点同时进行干预才可能有效。但是,同时针对多个靶标的单一结构的新药的研发是一项艰巨的任务。因此,联合用药实际已成为疾病治疗的主流和药物开发的重要方向。本研究选择姜黄素与CT-1042联合用药,评价研究CT-1042与姜黄素联合作用于人肺癌细胞的抗肿瘤作用及其分子机制,并采用本课题组发现并命名的“一带一线法”定量计算协同作用和拮抗作用。结果表明,CT-1042与姜黄素联合在体内外具有协同和相加作用,并通过线粒体途径诱导肿瘤细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡发挥联合抗肿瘤作用。