Sonic Hedgehog通过microRNA92a转录后调控KLF4在内皮功能中的作用机制研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:HELING0702
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Shh(Sonic hedgehog)信号通路作用于动脉粥样硬化病变。有研究表明microRNA-92a对于维持内皮功能有重要作用。在人髓母细胞瘤中,Shh被证实可以调控microRNA-92a的表达。在内皮细胞中, Shh信号通路是否能够调节内皮功能仍未见报道。本研究的目的是探讨Shh信号通路在调节内皮细胞功能中的作用机制。  方法与结果:在人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)中,过表达 Shh信号通路可以上调microRNA-92a的表达水平,下调KLF4(krüppel-like factor-4)的表达水平。反之,敲低Shh信号通路可以使microRNA-92a的表达水平下降和KLF4的表达水平升高,说明了Shh信号通路可以调控KLF4的表达。计算机软件预测到在KLF4的3’端非编码区(3’-untranslated region,3’UTR)存在两个高度保守的microRNA-92a的结合位点。我们应用荧光素酶报告基因证实了在microRNA-92a上存在与KLF4的3’端非编码区序列结合的特殊结合位点。下调microRNA-92a可以使KLF4,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及血栓弹力蛋白在蛋白及mRNA水平的表达均升高。另外,我们把 Shh-cDNA和 anti-miR-92a共转染到HUVEC中,与只转染Shh-cDNA的细胞相比,KLF4的蛋白表达水平恢复到正常HUVECs中KLF4的表达水平。本研究结果证实了上调Shh信号通路可以上调 microRNA-92a,microRNA-92a转录后调控 KLF4的表达,从而影响内皮细胞的功能。  结论:本研究证实了Shh信号通路可以通过microRNA-92a转录后调控KLF4在内皮功能中的作用。
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