转脂氧合酶Lox1基因水稻抗瘟性分析

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Liujiajia0801
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脂氧合酶(Lipoxygenase,EC1.13.11.12,简称LOX)是脂氧合酶途径中的关键酶之一,在植物的防卫反应过程中起重要作用。为了研究水稻脂氧合酶在水稻抗稻瘟病过程所起的作用,本实验室曾经从与稻瘟菌非亲和互作的水稻中克隆了一种脂氧合酶基因(Lox1),构建了其sense(1S)、antisense(1A)和hairpin(1H)结构的双元表达载体,并通过农杆菌介导法获得了转基因水稻。在此基础上,本研究对上述转Lox1基因水稻进行了转基因检测和抗瘟性分析。 潮霉素抗性分析表明,转基因的插入情况大多为单位点、单拷贝。分别对Lox1基因转sense、antisense和hairpin结构共135个株系的水稻T1、T2代植株进行了抗瘟性分析。1S结构转基因水稻接种亲和性稻瘟菌007小种,由感病性转变为抗病性:其中在62个转基因水稻株系中,有12个株系的T1、T2后代均发生了抗感病变化,另有1个只在T1后代发生了抗感病变化和28个株系只在T2后代发生了抗感病变化。1A和1H结构转基因水稻接种非亲和性稻瘟菌131小种,由抗病性转变为感病性:其中1A的30个转基因水稻株系中,有14个株系的T1、T2后代抗感病发生了变化,另外有7个株系只在T1代发生了抗感病变化和1个株系只在T2代发生了抗感病变化;1H的43个转基因水稻株系中,有6个株系的T1、T2后代发生了感病变化,另外有13个株系只在T1后代发生了抗感病变化和2个株系只在T2后代发生了抗感病变化。分别选取有抗感病变化的S结构9个株系、A结构5个株系和H结构5个株系作Southern杂交分析,结果表明所选转基因株系均来源于不同的独立转化事件,证明水稻表现出的抗感病变化与转入的基因有关。 转Lox1基因三种结构的抗感病性变化,证明了脂氧合酶在水稻抗稻瘟病中的作用,同时确认了脂氧合酶途径在植物防卫反应的重要作用。这对利用Lox1基因开展广谱、持久抗病育种具有指导意义。
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